特异降解性海藻酸盐水凝胶微载体的制备及改性研究

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以海藻酸盐为基质材料,胱胺为交联剂,采用W/O悬浮体系制备了具有大孔结构的化学交联海藻酸盐水凝胶微载体。由于其交联结构中含有二硫键,而二硫键在指定还原剂的作用下可发生断裂使交联结构解体,所以该微载体具有特异降解性。通过调节分散剂用量、搅拌速度实现了微载体的粒径可控性,而其溶胀度以及降解时间则受海藻酸盐水溶液浓度、壳聚糖浓度、交联剂用量的影响。海藻酸盐水凝胶作为细胞载体材料使用时缺乏细胞结合位点且无法有效吸附蛋白成分,针对这一现象,本文采用层层自组装技术,利用聚电解质之间的静电相互作用及肝素与生长因子的特异结合特性,用壳聚糖、肝素、纤连蛋白和生长因子对所制备的微载体进行了表面修饰,以提高微载体的力学稳定性和细胞亲和性。X射线光电子能谱(XPS)和傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)测试结果说明壳聚糖完全覆盖到微载体表面,而少量肝素也成功固定到微载体表面。以商业Cultispher-S微载体作为对照,进一步用所制备的海藻酸盐水凝胶微载体进行了HepG2细胞的附着培养,对微载体进行了生物学评价。结果显示,经不同物质修饰的微载体均可支持细胞的黏附与生长,但经纤连蛋白和生长因子修饰的微载体细胞的黏附性和增殖性明显增强,最大细胞数量与商业Cultispher-S微载体相当,而细胞的白蛋白分泌能力也几乎达到Cultispher-S微载体的水平,但细胞毒性却显著低于Cultispher-S微载体,这说明纤连蛋白和生长因子可以有效地提高微载体的细胞亲和性,经纤连蛋白和生长因子修饰的海藻酸盐水凝胶微载体适于作为细胞扩增载体应用。
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