人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)是一类感染人类表皮和粘膜鳞状上皮的小DNA病毒,可引起疣和乳头状肿瘤,其中HPV相关性宫颈癌已经成为威胁全球女性生命的第二大癌症。接种疫苗是预防病毒感染、减少宫颈癌发生的有效方式。目前,HPV疫苗是真核细胞表达系统表达的重组HPV衣壳蛋白L1通过自组装形成的病毒样颗粒(Virus-Like Particles,VLPs),接种后能刺激机体产生HPV中和抗体。然而,HPV的型别很多,表达HPV不同型别L1是目前制备多价疫苗的主要方法,且尚无采用原核表达系统制备HPV疫苗的报道。为了简化HPV疫苗的制备工艺,本研究以HPV 16型L1蛋白为研究靶点,以前期工作中通过表位串联方式构建的3个候选疫苗基因片段为基础,分别构建了三个疫苗蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了这三个疫苗蛋白,分别命名为rR5、rR6和rR8。由于三个蛋白主要以包涵体方式表达,在纯化过程中采用了变复性方法。为了检验以原核表达系统制备的HPV疫苗蛋白是否具有生物学活性,我们采用杆状病毒表达系统制备了HPV 16型L1 VLPs,经电泳分离及转膜后,以疫苗蛋白免疫的小鼠血清进行Western blot检测,结果表明rR5和rR6的免疫血清能特异性识别L1蛋白。说明以串联抗原表位的方式在原核细胞中可制备有潜在生物学活性的HPV疫苗,为HPV多价疫苗的研制提供了一个新思路。