论文部分内容阅读
第一部分3日龄新生鼠不同程度缺氧缺血性脑损伤的磁共振表现目的本实验通过建立3日龄新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,探讨:(1)新生鼠缺氧缺血性脑损伤不同受损程度常规磁共振(Magnetic resonance imaging,MRI)及磁共振弥散加权成像(Diffusion weighted imaging,DWI)的影像学表现。(2)DWI在缺氧缺血性脑损伤早期诊断中的价值。资料与方法选用健康、清洁级3日龄新生SD大鼠共104只,雌鼠50只,雄鼠54只,体重约7.3-10.7g,平均值:8.9±0.15g,随机分为3组:空白对照组15只、假手术对照组15只、模型组74只。模型组麻醉后行左侧颈总动脉结扎术,术后恢复1h后置于8%O2、92%N2的混合气体的密闭容器中,并设置环境温度为37℃,分别持续缺氧1h、2h、3h,制成不同程度HIBD动物模型,分别为缺氧模型1h组(19只)、缺氧模型2h组(20只)、缺氧模型3h组(35只);取相同时间出生只暴露单侧颈总动脉、不结扎、不缺氧的新生仔鼠(15只)为假手术对照组;另取相同时间出生未做任何处理的新生仔鼠(15只)为空白对照组。分别于模型制作成功后6-12h、12-24h、3d、7d行常规MRI及DWI扫描并观察各时间段各仔鼠的一般情况。取双侧额顶叶皮层及皮层下区、双侧海马、双侧侧脑室旁脑白质、双侧丘脑为本实验的感兴趣区(ROI),测量各部位表观弥散系数(Apparent Diffusion Coefficient,ADC)并分析组内及组间相同部位ADC值的差异。结果(1)3日龄新生SD大鼠在缺氧缺血模型制作成功后出现不同程度的运动行为学异常,如抽搐、躁动不安、皮肤发暗、干燥、自主活动减少、不能翻身等症状,而正常对照组与假手术组新生大鼠未出现上述异常表现。(2)磁共振成像表现:1h模型组与正常对照组比较,病变部位主要分布在左侧皮层及皮层下区,3d前有ADC值的减低,7d已恢复正常;2h模型组的病变部位主要分布在左侧皮层及皮层下区及部分左侧海马,在6-12h时ADC值最低,而后逐渐升高,于7d时恢复正常;3h模型组的病变部位在左侧皮层及皮层下区、右侧皮层及皮层下区、左侧海马、左侧侧脑室旁及左侧丘脑,分布广泛,左侧皮层及皮层下区受损最严重。对照组和假手术组常规MRI和DWI均未见明显异常信号。结论(1)HIBD早期损伤部位主要分布在皮层及皮层下区;缺氧时间越长,病变部位越广泛,对应的ADC值越低;(2)DWI可以更早期检测HIBD病变范围并进行预后评估,是检查HIBD的重要方法。第二部分3日龄新生鼠不同程度HIBD血清S100B蛋白表达变化及TTC染色的实验研究目的本实验借助3日龄新生大鼠HIBD模型,通过对血清中S100B蛋白浓度的检测与TTC染色,探讨:(1)血清S100B蛋白在新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤早期诊断中的价值。(2)血清S100B蛋白水平与脑损伤严重程度的相关性。(3)新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤后血清S100B蛋白浓度升高的出现时间、峰值时间及消失时间,为临床新生儿缺氧缺血性脑损伤的早期诊断和脑损伤评估提供实验依据。(4)TTC染色结果与磁共振弥散加权成像上病变的匹配关系,进一步验证脑损伤的缺血范围及程度。资料与方法(1)选用3日龄健康清洁级新生SD大鼠136只,雌雄各半,体重约7.5-11.8g,平均值:9.3±0.3g,随机分为3组:空白对照组(8只),假手术组(8只)及HIBD模型组(120只),根据缺氧时间的不同,HIBD组又随机分为3大组,即缺氧1h模型组、缺氧2h模型组、缺氧3h模型组。空白对照组、假手术组、各个模型组分别于模型制作成功后0h、12h、24h、3d、7d按照各个时间点取血,并留取新鲜脑组织。(2)采用ELISA法(双抗夹心法)检测血清中的S100B蛋白表达水平的变化。留取新鲜脑组织进行TTC染色。结果(1)HIBD组血清S100B蛋白分别与假手术对照组和空白对照组各时间点比较血清S100B蛋白浓度值均升高,P<0.05,差异有统计学意义,HIBD组在24h时,S100B蛋白浓度值达到最大值;血清S100B蛋白水平各时间点统计学分析:空白对照组组间比较血清S100B蛋白浓度,P>0.05,差异无统计学意义;假手术对照组组间比较血清S100B蛋白浓度,P>0.05,差异无统计学意义;空白对照组与假手术对照组比较,P>0.05,差异无统计学意义;表明假手术对照组S100B蛋白浓度表达稳定,未受手术因素的影响;(2)TTC染色结果显示苍白色梗死区域及面积与磁共振弥散加权成像异常信号部位及面积基本一致。结论(1)S100B蛋白可以作为HIBD早期诊断的生化指标。(2)新生大鼠HIBD血清中S100B蛋白在模型制作成功后12h开始升高,24h达到高峰,之后开始下降。(3)TTC染色可以作为判断脑梗死的重要染色方法。