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背景和目的 乳腺癌和卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,严重危害女性身心健康。由于现有的治疗方法临床疗效不佳,开发新的抗癌药物是全球医药工作者所面临的一项重要任务。HER-2(neu/c-erbB-2)是人类肿瘤中发生改变频率最高的癌基因之一,其编码产物具有酪氨酸激酶活性,属于HER/EGFR家族的第二个成员。由于目前已公认HER-2扩增和过表达与乳腺癌和卵巢癌的发生发展关系密切,且该基因编码产物是一种具有膜外位点结构的糖蛋白受体,故可作为抗乳腺癌和卵巢癌治疗的理想靶点。本课题旨在研究抗HER-2工程抗体chA21在体外抑制人乳腺癌和卵巢癌细胞生长及诱导其凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。 方法 在体外培养的条件下,用不同浓度的chA21作用于人乳腺癌和卵巢癌细胞,应用MTT比色法检测细胞生长抑制率,HE染色和透射电镜观察细胞凋亡的形态学改变,FCM和TUNEL染色法检测细胞凋亡率,免疫组织化学染色定量分析研究凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Fas、caspase-3及NF-κB表达的改变。 结果 (1)chA21(0.2、0.6、1.8和5.4mg.L-1)作用24/96h,可显著抑制高表达HER-2的人乳腺癌细胞SKBR3和卵巢癌细胞SKOV3的生长,且抑制作用呈剂量和时间依赖性,而其对低表达HER-2的人乳腺癌细胞MCF7的生长则无抑制作用。(2)chA21(0.2和5.4mg.L-1)作用于SKBR3和SKOV3细胞72h后,可观察到细胞凋亡的形态学改变。HE染色见凋亡细胞皱缩,核染色质浓缩深染,胞质嗜伊红