论文部分内容阅读
[目的]酒精依赖综合征(alcohol dependence syndrome,ADS)俗称酒依赖、酒精成瘾等,指反复大量饮酒引起的特殊心理状态,表现为对酒精的渴求和经常需要饮酒的强迫性体验,是饮酒导致对酒精的精神和躯体依赖。酒依赖是一种慢性脑病,属于精神疾病的一种,且是重大的公共卫生问题。酒依赖的病因及发病机制仍不清楚,比较一致的观点是多病因(生物、心理、社会环境等)共同作用的结果。其中酒依赖的形成受到遗传因素的影响最大,超过一半以上的饮酒风险度由遗传因素决定。因此,研究酒依赖的易感基因对酒依赖的防治具有重要意义。研究发现,5-羟色胺受体基因多态性与酒精依赖综合症的患病风险相关。但在不同民族种族人群中结果尚存争议。目前对于云南汉族人群的相关研究报道结论尚不一致。因此,本文选取5-羟色胺1B受体(HTR1B)、5-羟色胺2A受体(HTR2A)、5-羟色胺3A受体(HTR3A)、5-羟色胺3B受体(HTR3B)、5-羟色胺7受体(HTR7)基因的17个多态性位点作为研究对象,探讨5-HTR基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与酒精依赖综合征的相关性,寻找在中国云南省汉族人群中酒依赖的遗传风险位点。[方法]本研究依据《精神疾病的诊断及统计手册第5版》(Diagnostic&Statistic Manuel of Mental Disorders V,DSM—V)诊断标准从云南省精神病医院酒与药物依赖治疗科入院治疗的酒精依赖患者中选取100例作为酒依赖病例组,同时选取60例与上述病例组匹配的健康人群作为健康对照组。酒依赖病例组和健康对照组样本均为云南汉族男性。从各样本抽取5ml肘前静脉血,血液基因组DNA提取试剂盒提取DNA,采用通用荧光探针技术对上述160例样本的5个基因17个SNP位点进行SNP分型检测。利用SPSS 24.0、SHEsis等软件对结果进行统计和分析。[结果]1.Hardy—Weinberg平衡检验结果酒依赖病例组和健康对照组人群中的5个基因17个SNP位点(rs11568817,rs130058,rs6296,rs2000292,rs6311,rs6313,rs4941570,rs1176713,rs10160548,rs33940208,rs1062613,rs3782025,rs2276305,rs1176744,rs7916403,rs11596518,rs7904560)基因型频率分布均符合 Hard-Weinberg平衡(p>0.05)。2.单位点分析结果在云南汉族人群中,除HTR1B基因rs11568817和HTR3A基因rs1062613位点与酒精依赖综合征存在相关性外,其余SNP位点均与酒精依赖综合征无关。HTR1B基因rs11568817的等位基因频率分布差异在两组间有统计学意义,rs11568817 G等位基因频率在病例组分布显著高于健康对照组(p=0.038,OR=2.174,95%CI:1.030,4.589)。HTR3A基因 rs1062613 的基因型频率分布差异在两组间有统计学意义,rs1062613 CT的基因型频率在病例组分布显著高于健康对照组(p=0.037,OR=2.193,95%CI:1.048～4.366)。在HTR1B基因rs11568817隐性模型中GT+GG基因型频率在病例组分布显著高于健康对照组(p=0.0.08,OR=2.824,95%CI:1.281,6.224)。在 HTR3A 基因rs1062613显性模型中CC基因型频率健康对照组显著高于病例组(p=0.044,OR=0.432,95%CI:0.188,0.991)。3.连锁不平衡分析结果SHEsis软件分析显示上述5个基因中除HTR3Ars的各个SNP位点间均存在连锁不平衡。HTR1B 基因 rs6296 与 rs11568817、rs2000292 与 rs11568817、rs130058 与 rs6296、rs130058 与 rs2000292、rs6296 与 rs2000292 分别彼此呈强连锁(D’>0.8);而 rs130058 与 rs11568817 则呈完全连锁(D’= 1)。HTR2A基因 rs4941570 与 rs6311、rs6313 与 rs4941570 分别彼此呈强连锁(D’>0.8);而 rs6313 与 rs6311 则呈完全连锁(D’=1)。HTR3A 和 HTR3B 基因 rs1176713与 rs1062613、rs10160548 与 rs1062613、rs3782025 与 rs1176744、rs2276305与 rs1176744 分别彼此呈强连锁(D’>0.8);而 rs1176713 与 rs10160548、rs3782025 与 rs2276305 则呈完全连锁(D’=1)。HTR7 基因 rs7916403、rs11596518、rs7904560 之间呈完全连锁(D’=1)。4.单倍型分析结果对HTR1B、HTR2A、HTR3A、HTR3B、HTR7基因中的16个SNP位点进行单倍型分析,有19种单倍型在酒依赖病例组或健康对照组的频率大于0.03。单倍型分析结果显示,5个基因16个SNP位点在酒依赖病例组和健康对照组间的单倍型分布中不具有显著性差异(p>0.05)。[结论]1.在云南汉族人群中,除HTR1B基因rs11568817和HTR3A基因rs1062613位点与酒精依赖综合征存在相关性外,其余SNP位点均与酒精依赖综合征无关。HTR1B基因rs1 1568817等位基因G可能为云南汉族男性人群酒精依赖患病的风险因子,且在rs11568817隐形模型中GT+GG基因型可能使酒精依赖的患病风险升高。HTR3A基因rs1062613 CT基因型可能使酒精依赖的患病风险升高,而在rs1062613显性模型中CC基因型可能使酒精依赖的患病风险降低。2.HTR1B、HTR2A、HTR3B、HTR7中各SNP位点间均存在连锁不平衡,HTR3A中rs1062613、rs10160548与rs1176713位点间均存在连锁不平衡。3.单倍型分析结果显示,5个基因16个SNP位点在酒依赖病例组和健康对照组间的单倍型分布中不具有显著性差异(p>0.05)。