杨树PtCYP714 family基因克隆和功能分析偃伏棶木组织培养及再生体系建立

来源 :中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a9s5c112j6b
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山茱萸科株木属的Cormus stolonifera,自然分布于北美洲北部的大部分地区以及北半球的一些地区,不仅是一种极好的耐寒性观赏灌木,同时与其他北方物种相比有一定的耐盐性,而且现在广泛地用于生态修复。 本实验以偃伏株木叶片为外植体,建立了其叶片再生体系。我们设计了大量不同的细胞分裂素(6-BA)和生长素(IBA或NAA)比率的组合试验并进行统计分析,同时系统地研究了离体再生芽及丛生芽分化增殖的适宜培养基、不定根诱导的关键因子以及再生芽生根后植株移栽成活的影响因素。叶片外植体在添加0.5 mg/L 6-BA和1.0 mg/LIBA的1/2 MS上再生频率达100%,平均每个外植体上再生芽数为5.0±0.7。不定芽在添加0.5 mg/L 6-BA和0.25 mg/L IBA的1/2 MS培养基上能有效增殖。再生芽在添加0.5mg/L IBA的1/2 MS培养基上生根效果最佳。在叶片再生过程中选取典型组织进行扫描电镜观测,进一步证实了偃伏株木叶片直接体细胞胚发生过程。用携带有gus基因表达载体的农杆碱型EHA105农杆菌菌株浸染叶片外植体,能观察到其中gus基因的瞬时表达。上述结果为偃伏株木农杆菌介导的遗传转化奠定了坚实基础。
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