海洋红酵母耐盐基因cDNA文库的构建与序列分析

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fg1978
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海洋红酵母为单细胞真核生物,不能运动,细胞一般呈圆柱形、椭圆形或圆形,细胞长约3~10um,宽约15~5.5um,其形态和大小受培养条件和培养时间的影响常常会发生改变,其菌落为粉红色。繁殖方式主要为芽殖,少数为裂殖,条件适宜时有些种类可进行有性繁殖。红酵母属中有许多海洋红酵母种能寄附于鱼虾蟹体表,与其共生,而且可以在高盐条件下良好生长。 二十世纪以来,分子生物学与生物技术得到了迅猛发展,在农业和医药业都得到了飞速发展,尤其是人类基因组计划的成功实施,使人们更多的从事着生物技术行业,但是生物技术研究的范围很广,所以对于海洋红酵母的研究还处于刚刚起步阶段,上世纪80年代日本最早分离到海洋红酵母,然后发酵培养,用做鱼虾的营养饲料。目前对海洋红酵母的功能基因的报道还较少,本论文从寄附于鱼虾蟹体中的海洋红酵母中利用SSH技术构建了高效盐诱导基因cDNA文库,并取得了部分研究成果: 利用消减杂交技术构建了海洋红酵母盐诱导cDNA抑制差减文库,一共获得了270个阳性克隆。通过挑取25个克隆,然后进行测序,在NCBI中进行Blast序列比较,结果有一个初步认为与耐盐基因相关,12个与红酵母的rRNA有较高的同源性,10个属于无效序列,还有2个在Blast中比较时无任何序列线索。由此结果可以得出,可能有一些未知基因与海洋红酵母的耐盐性有关。由于海洋红酵母的功能基因报道的很少,在NCBI中只有20多个,所以本实验获得的三个基因片段很可能是耐盐相关基因,具有一定的研究价值。
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