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本文采用富集定向筛选法,从江西所特有的特色植物东乡野生稻根际土壤中分离、筛选出两株具有ACC(1-氨基环丙烷-1-羧酸)脱氨酶活性的促生菌,并利用生理生化和分子生物学手段对其进行了鉴定;然后以水稻9311为研究材料,用菌株接种水稻,研究其对水稻的促生作用及自然干旱胁迫下对水稻的影响,取得的结果如下:
1、经过富集培养,并以唯一氮源进行筛选,从东乡野生稻根际土壤中分离出两株具有较高ACC脱氨酶活性的根际促生菌,分别命名为A5和A18,其脱氨酶的比活力分别为0.1214U/mg、0.0671U/mg。对其促生指标测定后发现2株菌都可以产生IAA(吲哚乙酸)、有较好的溶解无机磷能力及产HCN(氰化氢)能力,且菌株A5的产IAA能力高于A18,A18的解无机磷能力高于A5,而两者的产铁载体能力都较弱。根据细菌形态、生理生化指标测定结果并结合16S rDNA序列的系统发育分析,最终将菌株A5、A18分别鉴定为温哥华假单胞菌(Pseudomonas vancouverensis)和Pantoea cypripedii。
2、催芽的水稻种子用菌悬液A5、A18、A5+A18浸种处理,出苗40天后进行相关指标测定。结果表明,接种菌株A5、A18、A5+A18处理组与不接种组CK(对照)比较,株高、叶宽、地上部和地下部鲜重等形态指标及叶绿素、可溶性蛋白、光合速率等生理指标都有较大提高。株高分别提高42.22%、33.96%、30.92%;地下部鲜重分别提高194.60%、192.89%、182.05%;地上部鲜重分别提高83.95%、67.06%、74.46%;总鲜重分别提高98.98%、84.15%、89.07%;叶宽分别增加62.45%、61.82%、58.60%;水稻叶片叶绿素a的含量分别提高23.20%、23.25%、22.65%;叶绿素b的含量分别提高105.57%、94.37%、59.43%;叶绿素总量分别提高50.76%、47.04%、34.95%;可溶性蛋白的含量分别提高26.88%、57.96%、46.24%;净光合速率分别提高22.33%、25.09%、19.37%;气孔导度分别提高68.56%、95.62%、51.77%;胞间二氧化碳浓度分别增加43.15%、63.82%、40.05%;蒸腾速率分别提高69.46%、81.59%、41.42%。由此可见,菌株A5和A18对水稻有很好的促生作用。
3、催芽的水稻种子用菌悬液A5、A18、A5+A18浸种处理,前期正常浇水,出苗40天后进行自然干旱处理,分别于干旱前一天和干旱胁迫的第一天、第二天,第三天、第四天进行各项生理指标的测定。结果表明:在干旱胁迫下,与不接种组CK相比,接种菌株A5、A18和A5+A18提高了水稻叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、及蒸腾速率(Tr),降低了其下降的幅度。且接种菌株A5、A18和A5+A18有助于水稻叶片渗透调节物质可溶性蛋白、脯氨酸及可溶性总糖的积累,于干旱胁迫的第三天达到最大值,此时可溶性蛋白含量分别为不接种组CK的1.53、1.17、1.33倍;脯氨酸含量分别为不接种组CK的1.84、1.09、1.34倍;可溶性总糖含量分别为不接种组CK的1.70、1.21、1.27倍。综合上述分析表明,接种菌株A5、A18、A5+A18可以提高水稻的光合能力、促进渗透调节物质的积累,以应对干旱胁迫。其中,菌株A5的接种效果显著。
1、经过富集培养,并以唯一氮源进行筛选,从东乡野生稻根际土壤中分离出两株具有较高ACC脱氨酶活性的根际促生菌,分别命名为A5和A18,其脱氨酶的比活力分别为0.1214U/mg、0.0671U/mg。对其促生指标测定后发现2株菌都可以产生IAA(吲哚乙酸)、有较好的溶解无机磷能力及产HCN(氰化氢)能力,且菌株A5的产IAA能力高于A18,A18的解无机磷能力高于A5,而两者的产铁载体能力都较弱。根据细菌形态、生理生化指标测定结果并结合16S rDNA序列的系统发育分析,最终将菌株A5、A18分别鉴定为温哥华假单胞菌(Pseudomonas vancouverensis)和Pantoea cypripedii。
2、催芽的水稻种子用菌悬液A5、A18、A5+A18浸种处理,出苗40天后进行相关指标测定。结果表明,接种菌株A5、A18、A5+A18处理组与不接种组CK(对照)比较,株高、叶宽、地上部和地下部鲜重等形态指标及叶绿素、可溶性蛋白、光合速率等生理指标都有较大提高。株高分别提高42.22%、33.96%、30.92%;地下部鲜重分别提高194.60%、192.89%、182.05%;地上部鲜重分别提高83.95%、67.06%、74.46%;总鲜重分别提高98.98%、84.15%、89.07%;叶宽分别增加62.45%、61.82%、58.60%;水稻叶片叶绿素a的含量分别提高23.20%、23.25%、22.65%;叶绿素b的含量分别提高105.57%、94.37%、59.43%;叶绿素总量分别提高50.76%、47.04%、34.95%;可溶性蛋白的含量分别提高26.88%、57.96%、46.24%;净光合速率分别提高22.33%、25.09%、19.37%;气孔导度分别提高68.56%、95.62%、51.77%;胞间二氧化碳浓度分别增加43.15%、63.82%、40.05%;蒸腾速率分别提高69.46%、81.59%、41.42%。由此可见,菌株A5和A18对水稻有很好的促生作用。
3、催芽的水稻种子用菌悬液A5、A18、A5+A18浸种处理,前期正常浇水,出苗40天后进行自然干旱处理,分别于干旱前一天和干旱胁迫的第一天、第二天,第三天、第四天进行各项生理指标的测定。结果表明:在干旱胁迫下,与不接种组CK相比,接种菌株A5、A18和A5+A18提高了水稻叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、及蒸腾速率(Tr),降低了其下降的幅度。且接种菌株A5、A18和A5+A18有助于水稻叶片渗透调节物质可溶性蛋白、脯氨酸及可溶性总糖的积累,于干旱胁迫的第三天达到最大值,此时可溶性蛋白含量分别为不接种组CK的1.53、1.17、1.33倍;脯氨酸含量分别为不接种组CK的1.84、1.09、1.34倍;可溶性总糖含量分别为不接种组CK的1.70、1.21、1.27倍。综合上述分析表明,接种菌株A5、A18、A5+A18可以提高水稻的光合能力、促进渗透调节物质的积累,以应对干旱胁迫。其中,菌株A5的接种效果显著。