目的:猪放线杆菌(Actinobacillus suis,A.suis)是一种能够定植在各个日龄健康猪上呼吸道的重要条件致病菌,并且A.suis可以在母猪身上进行垂直传播,能够造成哺乳仔猪的猝死。近几年来,A.suis已经逐步成为各个年龄段高度健康猪群的一个潜在隐患,并且在国外,甚至有被猪咬伤的人感染A.suis的报道。但目前国内对A.suis研究较少,特别是对其致病机理和毒力因子的研究鲜有报道,本研究选用两株A.suis标准菌株作为研究对象,通过构建A.suis对小鼠、黄兔、猪这三种动物的感染模型,对其进行病理组织学研究,探究A.suis的病理变化与致病机理。选择A.suis的部分毒力因子,研究它们在三种模型动物体内外表达的差异,探究A.suis的不同毒力因子在致病过程中发挥的作用。方法:将A.suisATCC15557和ATCC33415通过腹腔注射的方式分别感染小鼠、黄兔、猪,构建动物感染模型,观察模型动物的临床症状与死亡情况,定时进行抽血和体温测量,监测模型动物血液免疫细胞的动态变化。将发病死亡的模型动物剖检,在模型动物的各脏器进行A.suis的分离鉴定并制作病理组织切片,研究病理损伤情况;使用实时荧光定量PCR的方法研究ashA、oampA、apxⅢ、hugZ等A.suis重要的6种毒力因子在体外以及在模型动物体内主要脏器(肝、脾、肺、肾)的相对表达量,对比两株A.suis不同毒力因子在不同动物脏器的表达情况。结果:1、两株A.suis均能感染小鼠、黄兔、猪这三种动物,并可以造成死亡,其中A.suis ATCC15557对小鼠的LDs0为 1.265×108 CFU,A.suis ATCC33415对小鼠的 LD50为 2.350×108CFU。2、各模型动物临床主要表现为发病迅速、咳喘、震颤、行动不便、沉郁、高烧;剖检可见大部分模型动物腹腔积液,肾脏内有不规则小出血点,且肺中有大量纤维蛋白渗出;组织切片可见各病变器官内细胞坏死脱落且有大量炎性细胞浸润;尤其在动物肺脏中病变最为明显。在发病死亡的模型动物主要脏器(肝、脾、肺、肾)中均能分离到攻毒的A.suis菌株。3、两株A.suis无论在体外还是在模型动物体内的各脏器中,其毒力因子ompA的相对表达量普遍高于其他毒力因子;而在同样的体内或体外培养条件下,A.suis ATCC15557的大部分毒力因子的表达量略高于A.suis ATCC33415。从A.suis单个毒力基因在模型动物各脏器的表达情况来看,apxⅢ基因仅在各模型动物肺脏中大量表达;而ashC基因在三种模型动物的肝、脾、肺、肾中均有较高的表达量,其相对表达量均高于ashA基因且仅次于ompA基因,这一点与体外表达情况相反,说明ashC基因可能在动物体内致病过程中发挥的作用高于ashA基因;而hugZ基因和hgbA基因主要在各模型动物的肝脏和脾脏中表达较多。结论:1、A.suis ATCC15557的致病力略高于A.suis ATCC33415,两株A.suis对小鼠、黄兔、猪均有着较强的致病力,感染动物通常发病较快。2、A.suis对动物的各种脏器均能造成不同程度的损伤,其中以对肺脏造成的损伤最为严重。3、A.suis的毒力基因在体内外表达情况有所差异,ashA基因在体外相对表达量高于ashC基因,但是在动物体内各脏器相对表达量低于ashC;apxⅢ基因、hugZ基因和hgbA基因在体外相对表达量较低,但apxⅢ基因能够在模型动物肺脏中大量表达;hugZ基因和hgbA基因能够在模型动物肝脏中大量表达,说明A.suis的部分毒力基因需要在一定环境里才能发挥作用。4、ompA基因在体外以及模型动物体内各脏器的相对表达量均明显高于其他毒力因子,说明它在A.suis发挥致病力的过程中有着重要的作用。