近年来,抗生素临床应用的增加导致多重耐药革兰氏阴性肠杆菌科细菌感染越来越严重。磷霉素虽然自发现至今已有50年的使用历史,但由于其独特的抗菌机理和化学结构,对革兰氏阴性菌和部分革兰氏阳性菌仍具有杀菌活性,且与其他药物具有良好的协同作用。磷霉素作为人医的临床用药,其耐药菌的检出报道近几年在动物源及环境源大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌中有所增加。磷霉素耐药主要由磷霉素耐药基因fos A3介导,fos A3常在不同来源菌株与不同质粒中检测到,可与多种耐药基因协同传播,但蔬菜源磷霉素耐药菌株的相关报道较少。本文研究了磷霉素耐药基因fos A3在蔬菜来源肠杆菌中的传播规律,以防止耐药性进一步传播和兽医临床合理使用抗生素提供依据。本研究对2015年～2016年广州市各地区肉菜市场、超市的蔬菜样品中分离鉴定的233株产ESBLs肠杆菌PCR检测磷霉素耐药基因fos A、fos A3、fos C2等,及其他常见耐药基因。共检测到17株fos A3阳性菌株,均携带blaCTX-M基因。采用琼脂稀释法检测fos A3阳性菌对18种药物的敏感性,结果显示所有阳性菌株磷霉素MIC值均大于2048μg/m L,且至少对5种药物具有抗性,表现多重耐药现象,所有菌株对亚胺培南敏感。对15株fos A3阳性菌进行脉冲场凝胶电泳及MLST试验,结果显示所有菌株亲缘相关性低,肺炎克雷伯氏菌LC3及LDH4-2属于新的MLST分型。PFGE结果与MLST分型结果一致,表明fos A3阳性菌之间无克隆传播关系。通过接合试验、转化试验、southern杂交研究fos A3质粒的可转移性和定位,并对接合子/转化子进行复制子分型。选取部分fos A3阳性接合子/转化子提取质粒进行测序,分析质粒特征及fos A3基因环境。结果显示除LDL3-3的fos A3位于染色体外,其他菌的fos A3基因均位于质粒上;携带fos A3的质粒大多数为Inc HI2、Inc FII及其杂合型质粒、Inc FII亚型质粒等。Inc HI2与Inc FII质粒均具有典型的骨架结构,但可变区差异较大。Inc FII杂合质粒分为较常见的Inc FII:33-N及不常见的Inc FIIk-R,后者在Inc FII型质粒的可变区附近融合了R型质粒的部分骨架区而形成。另外在两株菌发现fos A3位于一种50 kb左右的不可分型质粒上,与已发表的其它质粒结构相似度不高。通过聚类分析获得5种不同类型的基因环境,显示fos A3可通过IS26在不同质粒间转移,其他插入序列如IS903、ISEcp1等常协同blaCTX-M基因与fos A3共转移。综上所述,蔬菜样品中的fos A3基因有着丰富的宿主菌来源,并由不同的质粒型所携带,且fos A3常与blaCTX-M基因共同传播,主要是通过Inc HI2、Inc FII型质粒或其杂合质粒、Inc FII亚型质粒进行水平转移。IS26在fos A3的水平转移中起到重要作用。由于蔬菜具有可直接食用的特殊性,存在通过食物链间接地向人体传递耐药基因的风险,因此有必要进一步加强对蔬菜污染耐药基因的监控。