【摘 要】
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海参具有很高的营养价值和药用价值,我国黄海、渤海附近的仿刺参品质极佳。海参是一种底栖滤食性的无脊椎动物,由于摄食能力差,行动缓慢,体内的微生物在消化吸收、免疫防御等方面起到了很大作用。海参肠道微生物的菌群组成和多样性与海参的健康状况、以及养殖环境等都有着密切的关系。海参在夏眠这一特殊时期前后,进食量会有很大的差异。随着进食量的变化,肠道内的菌群的组成和多样性也会发生变化。本研究基于高通量测序技术对
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海参具有很高的营养价值和药用价值,我国黄海、渤海附近的仿刺参品质极佳。海参是一种底栖滤食性的无脊椎动物,由于摄食能力差,行动缓慢,体内的微生物在消化吸收、免疫防御等方面起到了很大作用。海参肠道微生物的菌群组成和多样性与海参的健康状况、以及养殖环境等都有着密切的关系。海参在夏眠这一特殊时期前后,进食量会有很大的差异。随着进食量的变化,肠道内的菌群的组成和多样性也会发生变化。本研究基于高通量测序技术对池塘养殖仿刺参在不同进食阶段的肠道菌群结构进行分析,同时采用纯培养法分离肠道细菌,并对分离菌株的产酶活性和抗菌活性进行研究,为益生菌的开发和利用提供研究基础。本研究以山东省威海市南海新区养殖场的仿刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,采用高通量测序法研究了不同进食阶段仿刺参肠道菌群的组成和多样性,采用纯培养法对仿刺参肠道可培养细菌进行分离,对分离菌株进行了16S r RNA测序和系统发育分析,以及酶活的测定,包括蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和褐藻胶酶,采用纸片法对分离菌株的发酵产物粗提物对7种指示菌的抗菌活性进行了测定。从不同进食时期仿刺参肠道样品中共检测到36个门的细菌,其中变形菌门(Proteobacteria)所占的比例最高,其后是拟杆菌门(Bacteroidetes)和放线菌门(Actinobacteria)。在检测到的782个属的细菌中Halioglobus所占的比例最高。不同进食时期肠道细菌的种类数量和各个种类细菌所占的比例都有明显的变化。从仿刺参肠道中共分离到27株细菌,16S r RNA序列分析表明变形菌门和厚壁菌门细菌居多,其中芽孢杆菌属细菌最多。酶活筛选结果表明,有6株细菌同时具有产生4种消化酶的活性,1株细菌(HSN-04)的褐藻胶酶活显著高于其他菌株。抗菌活性结果表明,27株细菌都至少对1种指示菌有抑制作用,其中菌株HSJ-05同时对鳗弧菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌都具有较好的抗菌活性。结果表明,仿刺参肠道菌群的变化与进食过程有着密切的联系,从肠道中分离到的细菌具有促进消化吸收和抗菌的作用,可对海参的生长以及对环境适应产生较好的作用。
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