子宫内膜癌是发生于子宫内膜的一组上皮恶性肿瘤,是最常见的女性生殖系统肿瘤之一,其死亡率仅次于卵巢癌和宫颈癌。子宫内膜癌的发病与生活方式密切相关,其中最重要的两个因素是肥胖和雌激素的增加。目前,尽管大多数女性确诊时处于癌症早期,能够通过手术和辅助治疗进行干预,但仍有一部分女性会经历疾病复发,并且预后不良。子宫内膜癌的预后受到多种因素的影响,预后差的患者大多处于高龄,其肿瘤分化程度低,肿瘤分期晚。近年来,随着基础研究的开展,靶向治疗逐渐成为子宫内膜癌的一种可靠治疗手段,但目前,子宫内膜癌的有效靶点十分稀少,仍需寻找更多的治疗靶点。组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1（Lysine specific demethylase 1,LSD1）,又称KDM1A,是第一个具有组蛋白去甲基化酶活性的蛋白,参与表观遗传学中的组蛋白修饰。LSD1在许多癌症中异常表达,尤其是侵袭性肿瘤和低分化肿瘤。而在子宫内膜癌中,LSD1的研究则较少。此外,为了更好的研究LSD1影响子宫内膜癌的机制,我们通过文献查阅和数据库查询,发现四跨膜蛋白9（CD9）在子宫内膜癌中低表达,并影响子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭。有研究表明LSD1在胃癌中调控CD9的表达,子宫内膜癌与胃癌同属腺癌,因此我们猜想LSD1在子宫内膜癌中调控CD9的表达。目的本研究旨在探讨LSD1在子宫内膜癌中的作用及其机制,为子宫内膜癌能够作为治疗靶点提供更多依据。方法1.在Ishikawa、HEC1A、HEC1B和KLE四种子宫内膜癌细胞系中,用Western blot检测LSD1的表达水平,筛选出表达量最高的两种细胞系。2.以慢病毒为载体敲减子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC1A中的LSD1,以质粒为载体过表达Ishikawa细胞和HEC1A细胞中的LSD1,之后用荧光显微镜观察,Western blot和RT-q PCR分别检测实验组和对照组中LSD1的表达水平。3.通过CCK-8增殖实验和集落形成实验检测LSD1对Ishikawa细胞和HEC1A细胞增殖能力的影响。4.通过细胞划痕实验,检测LSD1对Ishikawa细胞和HEC1A细胞迁移能力的影响。5.通过细胞侵袭试验,检测LSD1对Ishikawa细胞和HEC1A细胞侵袭能力的影响。6.通过裸鼠皮下成瘤实验,检测LSD1在体内对子宫内膜癌组织生长的影响。7.通过Western blot检测Ishikawa细胞和HEC1A细胞中LSD1和CD9的表达情况8.通过免疫组化技术检测裸鼠肿瘤组织中LSD1和CD9的表达情况。结果1.在LSD1表达量最高的两种细胞系Ishikawa细胞和HEC1A细胞中,CCK8法结果显示,下调LSD1的表达后显著降低了细胞的增殖能力,而上调LSD1则结果相反;集落形成实验结果显示,下调LSD1的表达后,细胞的集落形成能力下降,而上调LSD1则结果相反。2.采用Transwell细胞侵袭实验检测LSD1对Ishikawa细胞和HEC1A细胞侵袭能力的影响,结果显示下调LSD1后,细胞的侵袭能力减弱,而上调LSD1后则相反;采用细胞划痕实验检测LSD1对Ishikawa细胞和HEC1A细胞迁移能力的影响,结果显示,下调LSD1后细胞的迁移能力降低,上调LSD1后的细胞迁移增强。3.通过裸鼠异种移植模型评价LSD1在体内对子宫内膜癌生长的影响,测量肿瘤的体积变化和剥离出的瘤体重量,显示了下调LSD1后,对照组裸鼠的肿瘤体积和重量远远大于实验组。4.在蛋白水平检测Ishikawa细胞和HEC1A细胞中LSD1和CD9的表达水平,结果显示,下调LSD1的表达后,CD9的蛋白表达水平随之升高,而上调LSD1后,CD9的表达水平降低。5.免疫组化法检测裸鼠皮下肿瘤组织中LSD1和CD9的表达水平,结果显示,LSD1下调时,CD9的表达水平增高,LSD1上调时,CD9的表达水平降低。结论1.LSD1在体外促进Ishikawa细胞和HEC1A细胞的增殖、迁移和侵袭。2.LSD1在动物体内促进子宫内膜癌的生长。3.LSD1在子宫内膜癌中与CD9负相关。