Twist在胃癌中的表达及其与上皮间质转化的关系

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目的:研究扭曲蛋白(Twist)、信号转导子和转录激活子3(Stat3)、上皮间质转化相关因子(E-cad)在胃癌组织及癌旁组织中的表达差异,分析三者与胃癌临床病理参数之间的相关性;分析Twist、Stat3与E-cad的相关性;探讨Twist、Stat3、E-cad的表达在判断胃癌患者预后中的意义。方法:采用免疫组织化学方法链霉亲和素-生物素复合物(SABC)法检测手术切除胃癌组织及癌旁标本中的Twist、Stat3、E-cad表达差异,分析其与胃癌患者年龄、性别、肿瘤的组织学类型、转移及TNM分期等参数的关系。结果:在胃癌组织中Twist、Stat3、E-cad的阳性率分别为57.3%、64.7%、12%,癌旁组织中的阳性率分别为17.3%、10.8%和68%,肿瘤组织中的表达与癌旁组织差异均有统计学意义。Twist的表达在肿瘤远处转移、淋巴结转移、TNM分期和浸润深度间差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01);Stat3的表达在肿瘤淋巴结转移、浸润深度及TNM分期间差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。Twist、Stat3表达与E-cad表达均呈明显负相关关系(P<0.01)。结论:胃癌组织中Twist、Stat3表达与肿瘤的生物学特征均有一定关系,Stat3的激活可能会增强Twist、E-cad的表达,检测Twist、Stat3、E-cad对预测肿瘤侵袭转移、判断预后具有一定价值。目的:利用RNAi干扰人胃癌细胞株BGC-823中Twist基因表达,观察细胞的生物学行为的改变,分析干扰前后细胞株中上皮间质转化相关因子E-cad、N-cad的表达的变化,初步探讨Twist在胃癌上皮间质转化现象中的作用及其临床应用价值。方法:根据Genbank中报道的Twist基因核苷酸序列,参考siRNA设计原则针对Twist序列设计干扰片段并构建其表达载体psilencer3.1-Twist重组质粒,将其瞬时导入人低分化胃腺癌细胞株BGC-823细胞中,RT-PCR检测Twist、E-cad、N-cadmRNA的表达,细胞免疫荧光检测细胞骨架蛋白F-actin的表达,Transwell小室检测细胞侵袭转移能力的改变。结果:瞬时转染psilencer3.1-Twist重组质粒后,RT-PCR检测BGC-823细胞中Twist表达在mRNA及蛋白水平均受到明显抑制,RT-PCR显示干扰后Twist、N-cad蛋白表达降低(P<0.05);免疫荧光检测F-actin在细胞中的表达位置并无明显改变。Transwell小室结果示干扰组细胞体外侵袭及迁移能力受到明显抑制(P<0.05)。结论:构建成功的Twist干扰表达载体,可以有效的抑制Twist在mRNA及蛋白质水平的表达;胃癌细胞株BGC-823中Twist的表达可能是其发生上皮间质转化的一个关键步骤;Twist可以作为提高胃癌疗效,延长其生存率的潜在靶点。
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