新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV）的HN和F蛋白可以刺激机体产生中和抗体，是NDV的主要保护性抗原。NDV是于副粘病毒科的一个成员。新城疫是由新城疫病毒引起的对禽类危害最大的一种急性传染病,被国际兽医局列为对畜禽危害最大的A类传染病之一。90年代后期，报道鸡群具有高抗体水平情况下也会发生新城疫。一些学者认为，新的基因型和亚型的出现是导致免疫鸡群出现新城疫的主要原因。因此，新城疫疫苗的研究成为重点。本研究旨从实验室保存的单克隆抗体中筛选得到具有保护性单克隆抗体，并进一步分析保护性单克隆抗体的抗原表位，为新城疫疾病机理的研究和表位疫苗的研究奠定理论基础。　　 首先，应用间接ELISA方法检测了F48E9株新城疫病毒分别与F306株、L27株和H55株单克隆抗体的反应效价。应用方阵法将NDV从1.5μg/ml稀释至0.04 μg/ml，将NDV多抗从1:500稀释至1:16000，确定了NDV抗原最佳包被浓度为0.37μg/ml和4℃过夜的条件。F306株、L27株和H55株单克隆抗体小鼠腹水均以1:1000开始倍比稀释，进行反应，测其OD492的值。结果F306株单克隆抗体为阴性，不与病毒反应；而L27株和H55株单克隆抗体与病毒反应，效价分别为1:16000和1:32000。根据亚类鉴定试剂盒测得F306株单抗和L27株单抗均为IgG1亚类，H55株单抗为IgG2b亚类。应用饱和硫酸铵沉淀法提纯上述单克隆抗体。　　 其次，应用细胞微量中和试验鉴定L27和H55两株单克隆抗体的中和病毒能力。　　 方法是接种NDV于BHK-21，计算病毒液的TCID50 (细胞半数致死量)。先将病毒稀释至工作滴度，再与倍比稀释的单抗腹水反应，最后加入单层BHK-21细胞，并观察细胞病变情况并记录。根据细胞病变效应（CPE）按Reed-Muench方法计算细胞半数保护量（The dose of antiserum protects 50％ of cell challenged,PD50）。结果只有H55株单克隆抗体具有一定的中和病毒能力，相对于病毒对照组，细胞病变延迟13小时，PD50为10-3.5；而L27株单克隆抗体没有保护性。　　 最后，分析F306株和H55株单克隆抗体针对的抗原表位。一是应用Western blot检测，表明这两株单抗均不与病毒反应呈现条带，提示这两株单抗针对的表位可能为构象型表位。二是应用噬菌体展示12肽库分别筛选H55株和F306株单克隆抗体识别的抗原表位。经过三轮淘选得到的噬菌体克隆，测序并利用blast同源性分析,得到序列IQPRMINS(M)PRP为H55株单克隆抗体识别抗原表位的重要序列。　　 综上所述，本文作者从实验室保存的新城疫病毒单克隆抗体中筛选得到一株具有中和作用的单克隆抗体，并利用噬菌体展示12肽库筛选其抗原表位，得到相应的模拟表位重要序列,为新城疫疾病机理研究和疫苗研究提供理论基础。