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目前,间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, MSCs)收获主要采用胰酶消化法,即通过破坏细胞与基底材料之间以及细胞与细胞之间的连接使细胞得以解离和分散,在一定程度上造成了细胞外基质损伤,因此影响了MSCs在组织工程和医学研究中的应用。聚N-异丙基丙烯酰胺((Poly(N-isopropylacrylamide), PNIPAAm)聚合物温敏表面可以实现细胞的粘附生长和降温脱附,为实现MSC的温和收获提供了一条有效的解决途径。本文采用碱处理法和自由基聚合法合成了三组不同接枝率(2.75%,6.25%和12.20%) 的 PVDF(Polyvinylidene fluoride)-g-PNIPAAm共聚物,傅立叶变换红外光谱(Fourier Transform Infrared Spectroscopy, FTIR)和氢谱核磁共振波谱(1H-Nulcear Magnetic Resonance,1H-NMR)分析表明,PNIPAAm已成功接枝PVDF上。利用浸没沉淀相转化法分别制备了三组聚合物相对应的PVDF-g-PNIPAAm薄膜,分别记为M20,M40和M60。扫描电子显微镜观察和静态接触角测量分析表明,PVDF-g-PNIPAAm膜表面具有微状结构,呈现出亲水性和温敏性。其次,我们利用全骨髓贴壁培养法分离纯化了大鼠的骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs),并且从形态学、细胞表面抗原、增殖能力及多向分化潜能方面进行了鉴定。结果表明,BMSCs呈现出类成纤维样细胞的梭形形态；第4代的BMSCs表面抗原CD34、CD29、CD90的表达率分别为2.1%、94.0%、92.6%,具有MSC表面抗原的表达特性；以5OOcells/cm2的密度接种于6孔板培养2周的克隆形成率为1.73%,符合干细胞增殖能力强的特性；经定向诱导培养后,BMSCs可以分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞。MTT实验和降温脱附实验表明,BMSCs可以在温敏膜上粘附生长,但细胞活性低于细胞培养板上的细胞活性,降温脱附的效率可达75%以上。诱导分化实验表明,M60温敏膜脱附收获的BMSCs仍保持了原有的脂肪分化和成骨分化能力。