甜菊糖苷的酶促糖基化及其表面活性的研究

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:plant720
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甜菊糖苷(steviol glycosides,SGs)是一种兼具生物活性和表面活性的天然低热量高倍甜味剂,目前作为糖替代品被广泛用于食品、饮料和药品中。然而SGs都存在不同程度的后苦涩味,导致部分消费者对以SGs为甜味剂的产品可接受度降低,SGs的酶促糖基化可以改善其味质。同时,SGs高甜度和表面活性的组合赋予了SGs作为多功能成分应用于食品加工的潜力。尽管国内外研究者对SGs的表面活性已经有了初步研究,但SGs结构与其表面活性之间的关系仍不明确,且它们对蛋白质发泡、乳化、凝胶等功能特性的影响鲜有研究。本论文建立了利用环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase Toruzyme3.0L)和葡萄糖淀粉酶双酶法制备单葡萄糖基莱鲍迪苷A(RAG1)的方法,明确了莱鲍迪苷A(RA)和RAG1的胶束对疏水性活性物的增溶机制;随后系统研究了代表性SGs:甜茶苷(Ru)、斯替夫苷(St)、RA和RAG1的表面活性及其构效关系,明确了上述SGs对蛋白质发泡、乳化和凝胶性能的影响,为SGs在泡沫、乳液和凝胶型食品体系的应用提供了理论指导和技术支撑。本论文的主要研究结论如下:1.RAG1通过水解RA的转糖基产物合成。首先研究了CGTase Toruzyme 3.0L催化下RA和β-环糊精(β-CD)的转糖基反应,通过单因素实验优化出该反应的最佳条件为:以水为反应介质,反应温度70℃,加酶量为1 U/g RA,RA的浓度为150 mg/m L,RA与β-CD的质量比为1(25)2,该条件下反应24 h后RA的转化率可高达95%,反应产物为多葡萄糖基RA;随后考察了α-中温淀粉酶、耐高温α-淀粉酶、β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶水解多葡萄糖基RA中葡萄糖苷键的难易程度,发现葡萄糖淀粉酶在加酶量为300 U/g GSGs时,上述多葡萄糖基RA在60℃下水解3 h后可得到以RAG1(69.5%)为主的水解产物。以甲醇为重结晶溶剂可将水解产物中RAG1的质量分数提纯至95.4%,转糖基产物RAG1的热稳定性与RA相当,但涩味与RA相比明显改善。2.研究和评估了RAG1和RA作为纳米载体封装疏水性物质艾地苯醌(IDE)的潜力及其缓释动力学。结果表明25°C下RAG1在水中的溶解度分别是RA的87倍、莱鲍迪苷D(RD)的391倍,RAG1的表面活性也高于RA和RD,并且只有RAG1和RA可以在水中自组装为胶束。IDE可以被增溶在RA或RAG1胶束的疏水内核中,使IDE的水溶性提高500倍。体外模拟肠胃液缓释结果表明,包封在RAG1/RA胶束中IDE在模拟胃液(SGF)和模拟肠液(SIF)中的溶出率显著高于游离IDE的溶出率,并且IDE在SGF中的累积释放率大于其在SIF中的累积释放率。此外,纳米载体的不同也会影响IDE的释放,缓释14 h后,RAG1胶束中IDE的累积释放率为RA胶束中IDE的累积释放率的117.1%(SGF)和119.8%(SIF),比游离的IDE的累积释放率高出777.5%(SGF)和456.7%(SIF)。缓释时间小于8 h时,IDE在SGF和SIF的释放速率几乎保持恒定,主要释放机制为非Fick扩散;缓释时间超过8 h时,释放机制改为由浓度梯度支配的Fick扩散。只有RAG1胶束增溶体系具有良好的储存稳定性,RAG1-IDE(50:1,w/w)水溶液在25℃储存98天后保持澄清透明。3.研究了SGs结构(Ru、St、RA、RAG1)对其表面活性的影响以及其与大豆分离蛋白(SPI)复合体系对溶液表/界面活性的协同作用。天然SGs降低表面张力、形成胶束的能力以及饱和吸附量与其分子苷元上连接的葡萄糖基数目成负相关:RA<St<Ru,RAG1的表面活性则略高于RA,归因于其含有额外的α-糖苷键,而不是天然SGs中存在的β-糖苷键。0.5-1.0 wt%SGs和0.5 wt%SPI的复合物在降低表/界面张力方面有着明显的协同作用,且SGs与SPI协同降低溶液表/界面张力的能力与SGs的极性成负相关:RAG1<RA<St<Ru。与单独由SPI稳定的泡沫或乳液相比,SGs与SPI复合物稳定的泡沫或乳液具有更高的稳定性,RA-SPI复合物作为乳化剂稳定的乳液对温度、p H和电解质的耐受性更高。分子对接结果表明SGs与SPI的结合主要通过范德华力和氢键发生,并且SGs与SPI之间的相互作用能随着SGs上的葡萄糖基数目的增加而降低;这一现象也在内源色氨酸荧光光谱中进一步得到证实。4.研究了几种代表性SGs(Ru、St、RA、RAG1)对热诱导乳清蛋白(WPI)凝胶性质的影响。当SGs的浓度(0.1-0.25 wt%)低于其临界胶束浓度(CMC)时,SGs在溶液中以单体形式存,与WPI的相互作用较弱,对WPI凝胶的凝胶化进程和凝胶性能的影响也较弱;当SGs的浓度(0.5-1.0 wt%)高于其CMC时,溶液中以单体和胶束两种形式存在的SGs分子共同与WPI发生相互作用促进了蛋白质的展开,此时SGs对WPI凝胶的凝胶化进程和凝胶性能影响显著增强。天然的SGs增强WPI凝胶储能模量(G’)和损耗模量(G")的能力以及缩短凝胶时间的能力与其表面活性成正相关(Ru>St>RA),而RAG1改善上述WPI凝胶性能的能力则仅次于Ru。SGs也会减弱SGs-WPI复合凝胶的频率依赖性;赋予SGs-WPI复合凝胶更卓越的弹性、持水性、热稳定性以及更加有序致密的网络结构。此外,分子对接表明SGs和WPI主要成分β-乳球蛋白之间的相互作用主要通过氢键、范德华力和疏水相互作用发生。
其他文献
社交媒体技术将原本异质化的不同受众混到了同一个语境中,导致人们无法再用线下对话中管理多重印象的技巧来处理线上的交往。本文将引入语境崩溃理论,基于微博“凡尔赛文学“的个案分析,讨论用户在社交平台互动过程中的自我呈现的问题。从使用动机出发,完美的网络形象的设置是用户自我满足和自我赋值,不同的语境呈现出的用户形象不尽兼容。网络语境扁平化,用户身份管理失控,其背后是用户自我认知失衡。扁平化的语境与浅薄的经
大型承台深基坑支护结构形式与基坑的平面尺寸、基坑的深度以及承台所在的地质条件有较大的关系。论文主要研究钢板桩围堰在细卵石土与粉砂岩互层地质条件高速大河道中的应用。采用旋挖桩引孔的方式插打拉森钢板桩,承台混凝土分两次浇筑,分层拆除围堰内支撑,以避免钢板桩围堰内支撑与承台之间的干扰,以上方案确保了大型承台基坑围护结构的安全。
本文从三部分梳理与分析综合材料绘画语言的精神性研究,一、当代文化视野下综合材料绘画语言的嬗变;二、综合材料绘画语言的丰富拓展对中国当代艺术的影响;三、综合材料绘画语言的精神性追寻。文章立足于全球化审美观念更新和跨界艺术思想的解放背景之下的中国民族文化的思想,表达综合材料绘画中绘画语言形式的丰富拓展对中国当代艺术的影响,积极建构现当代艺术中中国艺术“精神性”体系;更层次地表达了综合材料绘画本体的精神
采用溶胶凝胶法制备了棒状结构纳米五氧化二钒(NR-V2O5),并以此为原料进一步合成了三维分层多级结构的五氧化二钒(3D-V2O5)。最终以沥青为碳源通过静电吸附法在其表面均匀地进行炭包覆,制备了3D-V2O5/C复合材料,并将其作为锂离子电池正极材料组装电池。电化学结果表明,超薄3D-V2O5纳米片的独特结构和沥青炭的协同作用增强了3D-V2O5/C的电子/离子传导速率,使3D-V2O5/C表现
多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂是治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(m CRPC)的新型靶向药物,其对DNA损伤修复基因突变的m CRPC患者具有较高的药物敏感性,多项临床试验结果显示,PARP抑制剂单一疗法及联合疗法在m CRPC患者中具有明显优势,有望为m CRPC患者个体化、精准化治疗带来希望。然而,PARP抑制剂治疗仍有许多问题需纳入考虑,如安全性、耐药性等。对PARP抑制剂在mCR
衰老通常伴随着老年人胃肠道生理功能的退行性改变,如胃pH升高、消化液和胃酸分泌减少、胃肠道蠕动减弱、消化酶活性降低等。然而,关于这些变化对食物消化和胃排空特性的影响的定量研究较为缺乏。本研究利用体外动态胃消化系统,分别模拟了老年人与年轻人胃生理环境;系统研究了脱脂奶和藏族主食糌粑(主成分为青稞)分别在模拟老年人与年轻人胃肠消化条件下的微观结构、流变特性、胃排空、淀粉/蛋白质水解等。结果表明,与年轻
航空发动机制造技术的水平体现了航天航空工业的发展程度,航空叶片作为发动机的“心脏”零部件,其加工精度及表面质量直接影响着发动机的使用性能,因此需要通过现代化测量技术对航空叶片进行严格的管控。航空叶片的现代化测量问题一直制约着我国制造类企业的发展,一是测量效率较低,目前企业叶片三坐标测量流程需要大量的人工操作干预,耗费较多有效工时;二是空间利用率较低,叶片待测区域及检测区域的空间规划存在局限性,占用
随着国内外钢铁行业竞争加剧,项目成本成为获得项目的重要因素,而项目全流程的时间进度管理将直接影响钢铁企业和钢铁行业设备集成商项目成本的控制。因此作为项目管理的重要内容,项目时间进度管理对钢铁企业和设备集成商都至关重要。论文通过借鉴国内外工程项目时间进度管理相关经验,运用文献研究法、理论与技术相结合的分析法、案例分析法,结合镀锌电气自动化工程项目管理现状和需求分析,运用工作分解结构法(WBS)对项目
<正>早在春秋战国时期,人们就以麻织成夏布印花。至清代时,发展出以麻布为载体、以纯天然黄麻纤维设色的麻质画。因为防腐防虫防霉变、不易龟裂、可揉折、不褪色,麻质画被誉为“千年不烂软黄金”。一幅麻质画,需经选麻、染色、晾干、筛选、构图、上胶、上色、勾勒等步骤。选择有硬度、韧度的原麻,染成不同颜色,用剪刀铰碎,细至粉末状,用作颜料。从前都是手工剪制,将一根根长达2米的麻铰碎,
期刊