黄连木初代培养及褐变影响因子的研究

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随着能源消耗量的不断增加,常规能源的不可再生性和环境恶化效应,迫使人类不得不重新审视和调整能源发展战略,于是可再生的生物能源成为人类21世纪能源研究发展的热点。黄连木(Pistacia chinensis Bunge)属漆树科黄连木属落叶乔木,原产我国,是我国珍贵木本用材树种和生物能源树种。本实验以黄连木茎段为外植体,研究外植体最佳灭菌方法、腋芽诱导最佳培养基配方及褐变影响因子。在黄连木组培快繁初代过程中,外植体易发生褐变,导致外植体生理功能衰退,严重阻碍黄连木组培快繁的正常进行。本文对黄连木外植体褐变相关的影响因子进行了比较系统研究,目的在于从理论上认识外植体褐变,通过各因素对褐变的影响,找到影响褐变的主导因子,以期为抑制黄连木外植体褐变提供技术支持。研究结果表明:1.黄连木外植体最佳灭菌方法是:黄连木茎段→洗衣粉上清液浸泡10min并用软刷刷去表面污垢→自来水冲洗30min→超净台上用70%酒精浸20S→无菌水冲洗2次→0.1%升汞浸8min→无菌水冲洗8次→接种到培养基上。2.影响黄连木腋芽萌发的主要因素有:基本培养基、6-BA、NAA。黄连木腋芽诱导最佳培养基是:1/2DKW+BA1.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+IBA0.3mg·L-1 +食糖30g+琼脂8g,PH值5.8。3.黄连木外植体的取材季节和部位是影响褐变的主要因子,5月中旬是取材的最佳时期。琼脂浓度对黄连木外植体褐变有显著影响,添加8g·L-1琼脂的培养基防止褐变的效果最佳。低温处理对减缓褐变有一定的影响,但会影响外植体生活能力。水解乳蛋白防止外植体褐变的最佳浓度为300mg·L-1。缩短转接周期可以减轻褐变的发生,转接周期越长褐变程度越严重。不同种类抑制剂对褐变有着不同的影响,活性炭抑制褐变效果明显,常规褐变抑制剂硫代硫酸钠、VC、PVP对黄连木外植体褐变效果影响不显著。
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