细胞外ATP对菜豆光系统Ⅱ光化学特性的系统性影响及其对水分胁迫下菜豆光合作用调节能力的研究

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三磷酸腺苷(ATP)不但分布在细胞内部,而且广泛存在于动物和植物细胞的细胞外基质中。细胞外ATP(eATP)可与细胞膜表面相应的受体结合并激发细胞内的第二信使(Ca2+、H2O2等),而Ca2+、H2O2可参与细胞与细胞间以及组织与组织细胞间的系统性信号传播网,从而参与或调节植物光合作用对环境刺激的系统性响应。本研究主要以菜豆(Phaseolus vulgaris L)为实验材料,在叶片组织水平上研究了eATP对叶片叶绿素荧光特性的系统性影响及其作用机制;高光在植株水平上对菜豆光系统Ⅱ光化学效率的系统性影响以及eATP是否参与了这一系统性影响进行了探究;同时也拓展性的研究了eATP对干旱环境下植物光合作用的影响。主要有以下发现:  (1)eATP对菜豆叶片光系统Ⅱ光化学特性具有系统性影响。用外源ATP处理菜豆叶片的一侧,处理侧和同叶未处理侧潜在最大光化学效率(Fv/Fm)、非调节性能量耗散量子产量(Y(NO))与对照相比无显著变化;而实际光化学效率(Y(II))、电子传递速率(ETR)和光化学猝灭系数(qP)与对照相比均显著上升,但非光化学猝灭系数(qN)和调节性能量耗散量子产量(Y(NPQ))则显著下降。表明了细胞外ATP能够在组织水平上系统性地提高菜豆叶片PS II光化学效率。  为了进一步探索eATP对叶片PSII光化学效率系统性的调节作用中可能的信号通路,使用Ca2+和H2O2处理菜豆叶片一侧。结果显示,Ca2+或者 H2O2对PSII光化学效率的调节与外源ATP处理具有同样的效应,而且 Ca2+通道抑制剂LaCl3(氯化镧)以及H2O2清除剂DMTU(二甲基硫脲)的处理可减弱外源ATP对PSII光化学特性的系统性调节作用。综上可知,eATP对叶片光系统Ⅱ光化学特性的系统性调节机制与Ca2+或者H2O2有关。  (2) eATP参与了菜豆光系统Ⅱ光化学反应对高光的系统性响应。高光照射菜豆第一片羽状复叶可使其Fm(最大荧光产量)、Fv/Fm、Y(II)、ETR、NPQ(非光化学猝灭系数)和Y(NPQ)均显著下降,而初始荧光产量(F0)、qP和Y(NO)则显著上升。而同一植株未直接接触高光的其它叶片(高光系统叶, HL-S)的Fv/Fm、Y(II)、ETR、qP和Y(NO)显著上升, Fm、Y(NPQ)和NPQ则显著下降。上述结果表明,当菜豆植株局部叶片接受高光时,接受高光的叶片出现了高光胁迫,光化学效率被抑制,而同一植株未直接接触高光的系统叶片光系统II光化学活性却有所提高。为了进一步探究高光对系统叶片光系统II光化学活性的影响是否与eATP有关,检测了高光系统叶叶柄组织处胞外ATP(eATP)水平的变化,发现HL-S叶柄组织处eATP的水平显著高于未经高光照射植株的系统叶片(LL-S)。用ATP,AMP-PCP(eATP竞争性抑制剂),ATP磷酸水解酶(ATP Phosphohydrolase)分别处理高光系统叶片叶柄组织。发现, ATP处理使得高光系统叶Fv/Fm、Y(NO)、Y(II)、ETR、qP、NPQ和Y(NPQ)与对照相比均无显著性差异;用AMP-PCP和ATP磷酸水解酶处理后高光系统叶Fv/Fm、Y(NO)与对照相比无显著差异,但Y(II)、ETR、qP与对照相比显著下降, NPQ和Y(NPQ)则显著上升。综上表明叶柄组织处eATP水平的降低可影响高光系统叶光系统II光化学活性。因此,eATP有可能参与了高光信号的系统性传播途径。  (3) eATP可缓解干旱胁迫对菜豆叶片光系统Ⅱ光化学活性的影响。研究发现,PEG诱导的水分胁迫下,菜豆叶片Fv/Fm与对照相比无显著差异,而Fv/Fm、Y(II)、ETR、qP和NPQ与对照相比均显著下降。表明了水分胁迫降低了菜豆叶片光系统II光化学活性。同时水分胁迫也导致了菜豆叶片细胞外ATP水平的下降。对叶片施加0.2 mM的外源ATP不仅回补了水分胁迫下菜豆叶片细胞外ATP水平的降低,也使得水分胁迫下菜豆叶片Y(II)、ETR、qP和NPQ的水平得到了恢复。表明细胞外ATP对水分胁迫下叶片光系统II的光化学活性具有重要的调节作用。  综上可知,eATP作为一种重要的信号分子,通过调节细胞内第二信使Ca2+或 H2O2可系统性的调节整个叶片的光化学效率,并参与了高光对植株水平上叶片光化学效率的系统性调节过程。并且eATP对干旱胁迫下植株光合作用也具有一定的调节作用。
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