【摘 要】
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目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,研究突变型蛋白磷酸酶2A(PP2A)α催化亚基编码基因的小发夹RNA(shRNA)对人肺癌GLC-82细胞的影响。方法根据靶基因的不同区域设计四组shRNA,采用
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目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,研究突变型蛋白磷酸酶2A(PP2A)α催化亚基编码基因的小发夹RNA(shRNA)对人肺癌GLC-82细胞的影响。方法根据靶基因的不同区域设计四组shRNA,采用体外转录法合成,利用阳离子脂质体转染入GLC-82细胞,孵育48小时后,观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞的存活率,免疫印迹法检测蛋白质的表达。结果 与空白对照相比,四组shRNA作用不尽相同,其中一组shRNA可以明显抑制细胞的增殖,出现细胞凋亡形态学改变,并且抑制GLC-82细胞目的蛋白的表达。结论 成功筛选出一段能特异而高效地抑制突变型PP2Aα催化亚基基因表达的shRNA,为进一步研究该基因的功能和作用机制提供了新的手段。另外,应用RNA干扰技术可抑制突变型PP2Aα催化亚基编码基因在人肺癌GLC-82细胞中的表达,有望成为肺癌基因治疗新的研究线索。
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