猪大肠内产甲烷菌菌群结构及其影响因素

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Jianhcn
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本研究旨在探讨猪大肠内产甲烷菌的多样性及其菌群结构,以及受氧化还原电位(Eh)、pH和挥发性脂肪酸(VFA)的影响,以更好地支持猪甲烷产生机制与减排技术的研究。   试验选择饲粮相同体重为95kg左右的杜长大三元杂交猪30头,屠宰后立即测定盲肠、结肠上段、结肠中段、结肠下段和直肠的Eh和pH,并采集大肠内容物用于产甲烷菌和VFA的测定。通过建立产甲烷菌含methyl coenzyme reductase subunit A(mcrA)基因的16SrDNA克隆文库,对猪大肠内产甲烷菌的多样性及其种群结构进行分析,利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术测定总产甲烷菌和主要产甲烷菌的数量,再分析它们与Eh、pH和VFA之间的关系。主要研究结果如下:   (1)猪大肠各段的Eh均为负值,从盲肠到直肠呈现递增趋势,并介于-297.00mv~-423.00mv之间,直肠的Eh显著低于盲肠、结肠上端和结肠中段,与结肠下段的Eh差异不显著。猪大肠各段的pH介于5.04~6.97之间,各肠段间的pH、VFA均无显著差异。盲肠、结肠上段和结肠中段的Eh、pH存在显著相关性,大肠各段的pH、VFA都存在显著相关性;   (2)建立了由216个克隆子组成的含mcrA基因的16SrDNA克隆文库,由文库信息分析可知猪大肠内的主要产甲烷菌有甲烷杆菌,它占了总产甲烷菌的27.99%,另外甲烷微菌占了6.41%,还有65.60%都是未被分类鉴定的产甲烷菌;   (3)经Real-timePCR检测,猪大肠内含mcrA基因产甲烷菌的数量在5.16×107~2.69×1010cfu/g之间,甲烷杆菌的数量在2.04×105~8.22×108cfu/g之间,各肠段间总产甲烷菌和甲烷杆菌的数量差异均不显著,总产甲烷菌数量与Eh、pH和VFA之间的相关性均不显著;盲肠和直肠的甲烷杆菌数量与Eh值呈显著相关,相关系数分别为0.686和0.561。   以上结果表明,杜长大三元杂交猪大肠内的主要产甲烷菌为甲烷杆菌,同一品种体重相近的猪,在相同饲粮和饲养条件下,其大肠内环境是比较稳定的,产甲烷菌的数量与Eh、pH和VFA的相关性不显著。
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