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目的评价原位杂交法(in situ hybridization,ISH)、导流杂交基因芯片技术(HybriMax)、实时荧光定量PCR法(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)和流式荧光杂交法在宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染检测及宫颈病变诊断中的应用价值。方法从2004年1月—2007年4月,在中日友好医院妇科宫颈病变诊治中心行宫颈液基细胞检查者共21870例中,选取不同时间段内的特定的机会性筛查人群,分别行ISH和三种PCR基础上的检测方法,即HybriMax、FQ-PCR和流式荧光杂交法检测宫颈标本HPV DNA。其中,取189例组织学诊断为CIN和宫颈癌的组织石蜡切片标本(ISH组),用ISH行HPV16/18亚型检测;选取310例细胞学样本(HybriMax组),采用HybriMax进行21种HPV亚型的分型检测;选取600例细胞学样本(FQ-PCR组),用FQ-PCR进行8种HPV亚型分型及定量检测;选取1012例细胞学样本(流式荧光杂交法组),用流式荧光杂交法进行15种HPV亚型的分型检测。所有研究对象均同时用杂交捕获Ⅱ代(HC-Ⅱ)进行宫颈细胞13种高危型HPV的检测作为对照。比较各种方法与HC-Ⅱ之间的HPV DNA检测阳性率、符合率和Kappa指数(KI),以及对≥CINⅡ宫颈病变的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)。结果1.ISH组,ISH的HPV DNA总阳性率(55.08%)低于HC-Ⅱ(85.71%),P<0.01,有显著性差异;对≥CINⅡ宫颈病变的敏感性,ISH低于HC-Ⅱ(56.7%对90.1%),P<0.01,而特异性高于HC-Ⅱ(45.8%对27.1%),P<0.05,有统计学差异。2.HybriMax组,HybriMax与HC-Ⅱ对检测相同13种高危型HPV感染的阳性率分别为75.5%和73.5%,无统计学差异(P>0.05),总符合率92.3%,KI=0.796,一致性极好;对≥CINⅡ宫颈病变的敏感性、特异性、PPV和NPV,HybriMax分别为92.8%、28.6%、40.2%、89.7%,HC-Ⅱ分别为91.7%、34.7%、39.0%、90.2%,均无统计学差异,P＞0.05。3.FQ-PCR组,FQ-PCR与HC-Ⅱ的总阳性率分别为56.8%和64.5%,无统计学差异(P＞0.05),总符合率为86.7%,KI=0.722,结果一致性良好:对≥CINⅡ病变的诊断敏感性、特异性、PPV、NPV,FQ-PCR分别为83.9%、53.7%、41.4%、89.6%,HC-Ⅱ分别为88.7%、52.1%、38.5%、91.1%,均无统计学差异,P＞0.05。4.流式荧光杂交法组,流式荧光杂交法与HC-Ⅱ对检测13种高危型HPV感染的阳性率分别为49.0%和48.5%,无统计学差异(P＞0.05),总符合率为86.1%,KI=0.721,结果一致性良好:对≥CINⅡ病变的诊断敏感性,流式荧光杂交法(88.8%)低于HC-Ⅱ(93.1%),但无统计学差异,P＞0.05;流式荧光杂交法的特异性、NPV(分别为66.6%和91.7%)均低于HC-Ⅱ(分别为74.2%和96.5%),P值均＜0.01,有统计学差异;流式荧光杂交法PPV(54.2%)低于HC-Ⅱ(60.1%),P＜0.05,有统计学差异。结论1.在HPV感染检测及宫颈病变诊断中,HC-Ⅱ临床敏感性高,具有良好的检测性能。2.原位杂交法敏感性较低,方法费时,不适合大规模临床应用。3.三种PCR基础上的检测方法,即导流杂交基因芯片技术、实时荧光定显PCR法和流式荧光杂交法检测HPV DNA结果与HC-Ⅱ一致性好,具有可比性。4.PCR方法分析敏感性高,临床敏感性低于或近似于HC-Ⅱ;对诊断≥CINⅡ宫颈病变的敏感性、特异性、PPV、NPV,导流杂交基因芯片技术和实时荧光定量PCR法与HC-Ⅱ相似,而流式荧光杂交法逊于HC-Ⅱ.5.PCR方法具有分型检测的优点,实时荧光定量PCR法能进行分型的型別较少,但有定量检测的优点。