基于GFP高灵敏荧光增强型Hg2+传感研究

来源 :厦门大学 厦门大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ks00459
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
发展高选择性、高灵敏度的Hg2+生物识别与传感方法是颇为重要,也是一项富有挑战的课题。如何对待Hg2+的荧光猝灭效应以及避免Hg2+致蛋白变性,一直是开发基于蛋白的Hg2+荧光增强型传感分子的难题。  利用定点突变技术,对148 His进行一次突变,得到源于大型多管水母的GFP突变体,实现对Hg2+高选择性、高灵敏度的荧光增强型传感。低浓度荧光滴定实验表明,该识别体系对Hg2+具有低至亚纳摩尔级的检测限。吸收光谱和CD光谱实验指明了Hg2+引起蛋白荧光增强的机理,即GFP基态生色团的阴离子状态吸收增强。此外,我们用单分子FCS研究了Hg2+对突变体蛋白的影响,发现荧光增强过程中蛋白没有形成聚集、分子间二硫键以及发生构象变化,却观察到源于三线态的暗态增多过程,结合荧光增强时量子产率下降以及荧光寿命减少的数据,我们得以了解Hg2+对蛋白激发态的影响。进一步突变研究使我们相信,在荧光增强过程中,Hg2+借助巯基的结合作用,穿过蛋白外表面的孔径进入内部,影响生色团基态的分布情况。其它突变体蛋白的金属离子荧光响应实验表明,其它金属离子如Cd2+也可以通过引起蛋白阴离子生色团吸收增强而出现荧光增强响应。考虑到FPs的相似性以及越来越多的FPs突变体结构的解析,相信继续探索金属离子进入蛋白的位点、调节孔径大小,可以在GFP的基础上开发出对其它金属离子呈荧光增强型响应的生物传感分子。
其他文献
该论文包括两方面:I.1,8-二羟基蒽醌及1,2二羟蒽醌在乙醇体系中的辐射化学研究.对蒽醌和乙醇溶液γ-辐解所产生的溶剂化电子的反应进行了处理,计算得到反应的速率常数.并对1,
在颜真卿的众多碑帖中,属于书法启蒙练习的碑帖,最为突出的一部就是《大唐西京千福寺多宝塔感应碑》,简称《多宝塔》。这部碑帖在书法史上有重要的地位,是研究二王承袭与颜氏
该文通过模板合成法先将铜离子与线型的天然高分子吸附剂壳聚糖络合,再用环氧氯丙烷进行比较,之后将铜离子洗脱,得到交联壳聚糖树脂.通过改变壳聚糖与交联剂的量,制备了一组
该论文选取丝光沸石为研究对象,采用在合成体系中添加络合剂的新方法,将不同价态的杂原子Zn、Fe、Sn引入了分子筛骨架和孔道.采用多种表征手段对改性分子筛的晶形、结构和表
在众多高性能有机荧光染料中,氮杂氟硼-二吡咯亚甲基类(aza-BODIPY)分子具有卓越的光物理特性引起了研究者的广泛兴趣。例如其光化学性质稳定、较高的摩尔吸光系数ε(λ)和荧
分子探针对于淀粉样疾病的早期诊断与治疗药物的高通量筛选具有重要意义。对于探针分子与淀粉样聚集体结合机制的研究有助于指导高特异性新型探针分子的设计,指导药物、药物前
该论文通过对系列阳离子卟啉、金属卟啉及系列卟啉一金属氧簇超分子化合物的合成、表征及电催化氧还原行为的研究,以及对新的多原子桥联配体的双核钴化合物的电化学研究,得出
喹诺酮类药物具有广谱、高效、口服吸收良好等特点,因而在临床上得到广泛的应用,但喹诺酮类药物也存在固有的毒副作用.为了进一步提高疗效,尽可能地降低副作用,研究人员设计
学位
乳状液的稳定性和流变特性在实际应用中有着非常重要的地位,稳定性是乳状液得以应用的前提,而流变特性则确定了乳状液的应用环境.油水混合燃料是乳状液的一类重要作用,在液体