土壤微生物是地下生态系统的关键组成部分,在维持陆地生态系统和土壤生物地球化学功能方面发挥着重要作用。研究可培养微生物对土壤氮素的响应方式及其在氮素转化中的功能,将有助于深入理解微生物在土壤氮素转化中的作用。本研究基于沈阳农业大学长期定位施肥试验站,采用极度稀释平板法,结合16S r RNA和PCR分子检测技术,分析不同施肥处理下(不施肥对照,CK和施加无机氮肥,N4),土壤中可培养细菌的丰度、种群多样性及其氮素转化潜能,探讨长期施加无机氮肥对土壤微生物丰度和物种多样性的影响,初步解析土壤微生物的氮素转化潜能。研究结果表明:长期施加无机氮肥在显著增加土壤中铵态氮和硝态氮含量的同时,明显降低了土壤p H值。试验中共分离可培养细菌85株,其中,CK处理59株,N4处理26株。土壤中可培养细菌的丰度检测结果显示,与不施肥处理相比较,长期施加无机氮肥不仅明显降低了土壤中可培养细菌的数量(CK,59;N4,26),其可培养细菌的物种多样性也显著减少(CK,22;N4,14)。可培养细菌16S r RNA鉴定结果表明,不施肥处理(CK)土壤中,分离获得的可培养细菌在门水平的分类单元上,其菌株数量为:变形菌门>放线菌门>厚壁菌门;而长期施肥处理(N4)土壤中,可培养细菌数量为:放线菌门>变形菌门>厚壁菌门。在属水平的分类单元上,不施肥处理(CK)土壤中分离到22个属的菌株,N4土壤中分离到14个属的菌株。可培养细菌氮转化潜能(氨化作用、硝化作用、反硝化作用和固氮作用)研究结果显示,不施肥处理(CK)中可培养细菌具有氨化、硝化、反硝化和固氮能力的比例分别为64.6%、7.5%、62.5%和72.3%。土壤长期施加无机氮肥(N4),其土壤中可培养细菌具有氨化、硝化、反硝化和固氮能力的比例分别为31.6%、0%、64.7%、和63.2%。氮转化功能基因检测表明,菌株CK-F-41具有氨化、硝化和反硝化潜能;菌株CK-F-59具有氨化和反硝化潜能。