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本论文采用化学模式识别技术对中药枳壳、化橘红、田基黄的指纹图谱特征进行了计算机辨识研究,建立了全面反映其内在质量,并能进行有效监控的全新方法。 1.枳壳色谱指纹特征的化学模式识别研究: (1)枳壳TLC指纹特征的模式识别:对不同产地的枳壳药材样品进行了薄层色谱分析,获得了能体现枳壳药材共性、可对其进行有效鉴别的特征峰;并从中提取出能从整体上反映枳壳药材质量的数量化特征。通过聚类分析,建立了对枳壳药材质量进行计算机辨识的新方法。 (2)枳壳HPLC指纹特征的模式识别:对不同产地的枳壳药材样品进行了高效液相色谱分析,对提取方法、流动相及洗脱梯度、色谱柱、仪器、检测波长等色谱条件进行了优化,完成了系统的方法学考察,构建了枳壳药材HPLC指纹特征图谱,并对枳壳药材HPLC图谱的相似度进行了评价。以峰面积相对百分含量为量化特征值进行系统聚类分析,可准确区分枳壳样品的来源。建立了典则判别函数和Fisher’s判别函数。本方法能准确鉴别枳壳药材的真伪,同时还能反映其质量的优劣。 (3)枳壳化学成分的HPLC-MS分析:采用高效液相色谱-质谱联用技术对枳壳化学成分进行了研究,对MS裂解碎片峰进行了归属,鉴定了柚皮苷、柚皮素、新橙皮苷、橙皮苷、辛弗林5种成分,并测定了其在药材中的含量。 (4)柚皮苷单体的提纯:建立了从枳壳中提取柚皮苷单体(纯度达98%以上)的方法,并进行了药效学研究,为今后新药的研究开发创造了条件。 2.化橘红指纹特征的化学模式识别研究: (1)化橘红宏量与微量元素特征的模式识别:以化橘红宏量与微量元素含量为分类特征,通过聚类分析,找出其内在规律。结果表明:不同产地、不同来源的化橘红在宏量与微量元素含量上存在一定差异,依此可鉴别正品化橘红。本实验为化橘红药材地道性研究和鉴别分类提供了科学第一军医大学博士学位论文依据。 (2)化橘红HPLC指纹特征的模式识别:对不同产地、不同品种的化橘红样品进行了HPLC法分析,获取了能够反映化橘红药材质量优劣的HPLC指纹特征,用系统聚类分析法对化橘红样品的真伪进行了鉴别。在此基础上进一步建立了典则判别函数和Fisher’s判别函数。计算机模式识别技术为化橘红质量的评价提供了一种全新的方法。 (3)化橘红超临界COZ萃取产物的GC一MS分析:用GC一MS联用技术分析了3种化橘红样品超临界COZ流体萃取物的化学成分,鉴定了25个化合物,其中有13个成分系首次从化橘红中分得。 3.田基黄色谱指纹特征的化学模式识别研究: (l)田基黄TLC指纹特征的计算机模式识别:构建了田基黄药材TLC指纹图谱,并对指纹特征进行了计算机解析与处理:建立了典则判别函数和FISher’S判别函数,为田基黄药材的质量评价提供了一种全新的方法。 (2)棚皮素一7一O一鼠李糖营单体的提纯:棚皮素一7一O一鼠李糖昔是田基黄治疗肝炎的主要有效成分之一。本实验建立了从田基黄药材中提取栩皮素一7一O一鼠李搪昔单体的方法,为今后新药的研究开发创造了条件。 利用化学模式识别技术对中药指纹特征进行计算机辨识,依此监控积壳、化橘红、田基黄药材的质量在国内外属首创,处于国内领先水平。本研究具有理论意义和实用价值,同时对指纹图谱在中药产业的应用起到了示范作用。