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目的:通过腹腔注射L—精氨酸、大肠杆菌稳定构建重症急性胰腺炎(SAP)及其继发感染大鼠模型,检测血清及胰腺组织、肝脏组织及肺组织中髓样细胞表达激发受体—1(TREM—1)的表达含量,探讨TREM—1在重症急性胰腺炎继发感染早期的诊断价值及其作用机制,为重症急性胰腺炎的临床诊断及治疗提供依据。
方法:24只雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、重症急性胰腺炎继发感染组(SISAP组)。通过腹腔注射L—精氨酸、大肠杆菌构建动物模型;制模后24h腹腔麻醉,取血和腹水进行细菌培养,心脏采血离心取血清,生化分析仪检测血清中淀粉酶活性、ALT、AST;ELISA检测血清CRP、TNF—α及TREM—1表达变化,留取部分胰腺组织、肝脏组织、肺组织甲醛固定后,进行病理组织学观察;提取胰腺组织、肝脏组织、肺组织中mRNA和蛋白,分别采用Real—time PCR和Western Blot方法检测其TREM—1 mRNA和蛋白的表达。
结果:大体形态观察见C组大鼠脏器无坏死,SAP组大鼠胰腺出血水肿,肝脏及肺组织轻度水肿、瘀血,SISAP组大鼠胰腺组织坏死,肝脏、肺脏坏死较SAP组严重;SAP组和SISAP组胰腺、肝脏及肺组织病理评分明显较C组高,且SISAP组与SAP组比较差异也具有统计学意义(P<0.05);血和腹水细菌培养阳性率:C为0(0/8),SAP组为12.5%(1/8),SISAP组为100%(8/8),证实造模成功。生化检测结果:SAP组和SISAP组血清淀粉酶值、ALT、AST均明显高于C组(P<0.05),且SISAP组与SAP组比较差异也具有统计学意义(P<0.05);ELISA检测显示SAP组和SISAP组的CRP、TNF—α均明显高于C组(P<0.05),但两组之间差异无统计学意义(P=0.262及P=0.359);血清TREM—1 ELISA检测结果显示:SAP组(5.54±0.34 ng/ml)和SISAP组(9.32±0.86 ng/ml)均明显高于C组(4.44±0.28ng/ml,P<0.05),且两组之间比较差异也具有统计学意义(P<0.05);Real—time PCR检测胰腺、肝脏及肺组织TREM—1表达水平显示SAP组和SISAP组均明显高于C组(P<0.05),且SISAP组与SAP组比较差异也具有统计学意义(P<0.05);Western Blot检测胰腺、肝脏及肺组织中TREM—1蛋白表达与其mRNA改变基本一致。
结论:TREM—1在SAP早期继发感染及其多脏器功能障碍(MODS)中表达明显增高,对SAP的诊断及其治疗具有潜在的临床应用价值。