背景及目的脓毒症患者普遍存在凝血异常,表现为急性脓毒症凝血病,严重时发生急性弥散性血管内凝血（DIC）。目前的研究显示与促凝物质释放和内皮损伤相关,但是机制仍不明确。在细胞未激活时,磷脂酰丝氨酸（PS）被严格限制分布在细胞膜的内侧面。当细胞激活或凋亡时,磷脂酰丝氨酸在多种酶的作用下转至细胞膜的外表面。脓毒症时血小板激活甚至凋亡,细胞表面均有磷脂酰丝氨酸暴露。磷脂酰丝氨酸不仅可以为内外源X因子活化和凝血酶生成提供催化平面,并且磷脂酰丝氨酸通过与吞噬细胞表面相应受体结合介导对凋亡细胞的清除。巨噬细胞作为专职的吞噬细胞,在炎症中起到识别、吞噬细菌及衰老细胞的作用。但脓毒症时细菌毒素大量入血,巨噬细胞数目有限,并能够与血小板形成复合体加重炎症反应。内皮细胞等非专职的吞噬细胞可能发挥吞噬功能。乳粘素是由人体巨噬细胞和内皮细胞分泌的一种糖蛋白,包含EGF和C样两个主要结构域。其中C2结构域能够结合暴露在凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸。环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸基序是乳粘素EGF2结构域中的主要成分,特异性地与吞噬细胞表面的整合素αvβ3/5结合,促进吞噬细胞对凋亡细胞的吞噬。本研究意在探索脓毒症时血小板清除的新途径;阐释内皮细胞清除作用对脓毒症血小板促凝活性的影响。方法用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测脓毒症血小板和健康对照血小板的磷脂酰丝氨酸外翻;用光学显微镜,扫描电子显微镜,透射电子显微镜和流式细胞仪分析脓毒症血小板形态改变和血小板-白细胞复合体;用流式细胞仪,透射电子显微镜,扫描电子显微镜和倒置荧光显微镜分析内皮细胞对脓毒症血小板的吞噬和乳粘素加强的吞噬;用血凝仪测定脓毒症血小板和健康对照血小板凝血时间;用酶标仪检测脓毒症血小板和健康对照血小板凝血产物和纤维蛋白生成。结果新鲜分离的脓毒症患者血小板的磷脂酰丝氨酸外翻率约9%,较正常人血小板高3倍。脓毒症血小板激活伸出伪足,甚至凋亡形成微粒。健康对照血小板多数未激活,成球形,无伪足。脓毒症血小板与白细胞及红细胞形成血小板异型复合体,脓毒症时外周血中血小板-中性粒细胞复合体,血小板-淋巴细胞复合体,血小板-单核细胞复合体含量分别是健康对照组的3倍,5.3倍和2.5倍。人脐静脉内皮细胞可以结合、吞噬并随之消化脓毒症血小板,但与健康对照血小板作用微弱。与健康对照血小板相比,脓毒症血小板凝血时间明显缩短,且促凝活性（PCA）显著增强,表现为增多的内源性FXa和凝血酶生成。脓毒症血小板表面形成纤维蛋白网,甚至形成血小板-纤维蛋白栓。被人脐静脉内皮细胞吞噬后,磷脂酰丝氨酸外翻的血小板的因子Xa,凝血酶及纤维蛋白生显著减少,凝血时间延长。脓毒症血小板与内皮细胞孵育后,激活的血小板数目减少,再与白细胞孵育,生成的血小板-白细胞复合物显著减少。使用膜联蛋白V阻断脓毒症血小板表面磷脂酰丝氨酸,内皮细胞对血小板的吞噬被抑制80%,阻断血小板表面P-选择素,血小板吞噬也明显降低,但阻断血小板表面分子GPIB和GPIV对脓毒症血小板吞噬作用微弱。阻断内皮细胞表面整合素αvβ3明显抑制血小板吞噬,增加促凝复合物产生。乳粘素增强脓毒症血小板的吞噬达2倍,协同吞噬减弱脓毒症血小板75%的内源性Xa及凝血酶生成和大约50%的纤维蛋白产生,使脓毒症血小板凝血时间几乎恢复正常。结论脓毒症血小板表达磷脂酰丝氨酸增多,增加其促凝活性并增强其清除。内皮细胞可以内吞并消化脓毒症血小板从而减少表达磷脂酰丝氨酸的血小板数目,抑制其促凝活性和纤维蛋白生成,减少激活血小板与白细胞的相互作用和血小板-白细胞复合体含量。乳粘素和吞噬可以协同作用增加激活血小板的吞噬,更高效地改善脓毒症的凝血紊乱。