阿维拉霉素是发酵法来源的一种新型兽用消化促进剂和代谢调节剂,由绿色产色链霉菌(Streptomyces viridochromogenes)发酵产生,被广泛应用于畜禽饲料中,效果显著,安全性极高,具有较好的应用前景。目前,菌种产素能力低、产品价格昂贵是限制阿维拉霉素在国内普遍应用的主要因素,因此本文通过传统诱变方法和代谢工程手段两种方式对阿维拉霉素生产菌进行高产菌株选育与遗传改造。为了提高阿维拉霉素生产菌的产量,本文以实验室保藏的绿色产色链霉菌(Streptomyces viridochromogenes NRRL2860)为出发菌株,采用紫外一氯化锂、微波-吖啶橙多轮复合诱变,结合氯化钙、阿维拉霉素、链霉素多重抗性筛选,获得一株遗传稳定的高产菌株MY-20。摇瓶发酵结果显示,与原始出发菌相比,菌株MY-20表现出高产菌株的生长代谢特性,168小时阿维拉霉素A和B组分产量达到1.Og/L和3.08g/L,分别比出发菌提高了488%和584%。同时,本课题尝试采用代谢工程手段提高阿维拉霉素产量,建立了绿色产色链霉菌种属间接合转移方法,Streptomyces viridochromogenes大肠杆菌以pSET152做为接合转移载体,MS做为接合转移最优培养基,以供体菌E.coli ET12567(pUZ8002)和受体菌Streptomyces viridochromogenes1:1的比例是Streptomyces viridochromogenes接合转移体系的最优条件,实现了阿维拉霉素生物合成过程的关键基因aviD在绿色产色链霉菌中的强化表达,并得到了菌株TF-1、 TF-2,发酵摇瓶结果显示,重组菌株的产量比对照菌阿维拉霉素A组分提高了150%,同时,阿维拉霉素副组分B消失。结果表明,通过强化表达阿维拉霉素D(?)olivose和2-deoxy-D-evalose路径的初始酶dNTP-葡萄糖合成酶的编码基因aviD,能有效提高阿维拉霉素有效组分的生物合成量。