Hsacirc0010882在胃癌中高表达及其功能分析研究

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背景:大量文献表明环状RNA与胃癌发生发展有关,本研究旨在检测hsacirc0010882在胃癌患者血清及胃癌细胞株中的表达量,阐明hsacirc0010882对胃癌细胞增殖、转移等恶性生物学行为的影响,探索其可能参与的调控机制,对胃癌患者的治疗和管理提供新的思路。方法:1.利用实时荧光定量PCR检测hsacirc0010882在正常的胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞中的表达量,胃癌患者血清和正常人血清中表达量,并分析该分子与胃癌患者临床病理特征的相关性。根据胃癌患者术后生存情况,制作Kaplan-Meier生存曲线分析环状RNA分子hsacirc0010882表达与胃癌患者预后的关系。2.采用慢病毒感染技术建立hsacirc0010882过表达和低表达的胃癌细胞模型。通过CCK-8实验,Transwell侵袭和迁移实验、细胞凋亡实验分析hsacirc0010882对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为的影响。3.结合体外实验结果和生信分析及查阅文献,找到hsacirc0010882可能参与调控的信号通路。利用western blot验证hsacirc0010882是否通过该通路达到对胃癌细胞的调控作用。结果:1.hsacirc0010882在四种胃癌细胞株中的表达量都高于正常的胃黏膜上皮细胞,其中hsacirc0010882在MKN-45,SGC-7901细胞株中表达量最高。hsacirc0010882在胃癌患者血清中的表达量高于正常人血清中的表达量,且与胃癌患者的临床分期,瘤体大小呈正相关;hsacirc0010882高表达的胃癌患者生存期要低于hsacirc0010882低表达的胃癌患者。2.体外实验结果显示,当hsacirc0010882在胃癌细胞中过表达时,可以明显促进细胞的增殖、迁移、侵袭能力,对凋亡率无明显影响;当hsacirc0010882在胃癌细胞中低表达时,可以抑制细胞增殖、迁移、侵袭能力,并促进细胞凋亡;3.结合体外实验结果,通过查阅大量相关的文献,最终以PI3K/Akt/mTOR为hsacirc0010882可能参与调控的信号通路。采用western blot对PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活状态进行验证,结果显示hsacirc0010882过表达可以促进PI3K/Akt/mTOR信号通路的表达。结论:hsacirc0010882在胃癌中高表达,且表达水平与临床分期、瘤体大小正相关,能够成为胃癌患者预后的独立预测因子。Hsacirc0010882对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移等恶性生物学行为有正性调控作用。Hsacirc0010882通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,促进胃癌的发展。
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