【摘 要】
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本文将磁性微球技术、标记技术和纳米技术相结合,探索高灵敏度化学发光免疫分析新方法。基于化学发光、光谱学等手段对构筑的免疫分析新方法性能进行研究。结果表明,所建立的
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本文将磁性微球技术、标记技术和纳米技术相结合,探索高灵敏度化学发光免疫分析新方法。基于化学发光、光谱学等手段对构筑的免疫分析新方法性能进行研究。结果表明,所建立的检测方法灵敏度高,易制作、简便,在生化分析中将具有广阔的应用前景。本文主要开展了以下几个方面的工作:一、化学发光磁酶免疫分析方法的研究及其应用研究基于磁性微球的化学发光双抗体夹心酶联免疫分析方法,利用Luminol-H2O2化学发光酶联免疫分析体系实现了对甲胎蛋白抗原(AFP)的灵敏检测。该方法测得的相对化学发光强度与AFP浓度在0.8-8.0 ng/mL范围内呈线性关系。用该方法应用于人血清样品中AFP的检测,并与经典的ELISA法进行了对照,二者相关性良好。二、鲁米诺标记金纳米粒子化学发光磁性免疫分析方法的研究及其应用研究以金纳米粒子为载体,利用共价结合作用固定发光底物鲁米诺和癌胚抗原抗体(anti-CEA),建立了一种新型的、简便的化学发光标记技术,研究了一种新型测定CEA的化学发光磁性免疫分析方法。利用Luminol-H2O2-Co2+无酶化学发光体系对CEA测定的线性范围为线性范围为5.0 ng/mL-20.0 ng/mL。用该方法对人血清样品进行了测定,并与ELISA法进行了对照,二者相关性良好。三、异鲁米诺标记聚苯乙烯微球化学发光法测定谷胱甘肽结合标记技术,将异鲁米诺标记在官能团化的聚苯乙烯微球上。利用Islouminol-H2O2-HRP化学发光体系,以磁性微球作为载体,结合谷胱甘肽打断双硫键的性质,研究测定游离谷胱甘肽和细胞内的游离巯基化合物的化学发光分析方法。该方法测定谷胱甘肽的线性范围为5.0×10-10 M-8.0×10-8 M。
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