小鼠原位左肺移植模型的建立及学习曲线分析

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研究背景和目的小鼠原位肺移植模型在肺移植研究领域显示出了巨大的科研价值,但该模型在建立过程中面临显微外科手术技巧方面的巨大挑战。小鼠解剖结构精细,手术过程需全程在显微镜下进行操作。小鼠气道对外来刺激高度敏感,开胸手术耐受性差,因而增加了麻醉气管插管及术中术后气道管理的难度。由于小鼠原位肺移植出现时间不长,目前没有统一的建立方法,术中需要借助很多经过改造的特殊器械和设备。到目前为止,小鼠原位肺移植模型在世界范围内只有极少数机构能够独立建立。我们需要借助小鼠原位左肺移植模型的建立开展后续研究。方法采用C57/B6小鼠作为供、受体,行同系小鼠原位左肺移植,使用Cuff套管法进行气管及血管吻合。经过适当的手术学习曲线后,为进一步探索最佳手术条件,实验小鼠分为:供—受体体重高差异组和供—受体体重低差异组;LPD液灌注组和Euro-Collins液灌注组;肺动脉灌注组和肺动脉+肺静脉灌注组;大直径套管移植组和小直径套管移植组;小潮气量高呼吸频率通气组和大潮气量低呼吸频率通气组。采用上述分组方案分别用以研究:供受体间体重差异对移植结局的影响;不同肺保护液灌注后对移植肺的影响;经肺静脉逆行灌注对肺移植物结局的影响;吻合口套管大小对肺移植物及手术的影响;不同呼吸参数设置对肺移植物和受体术后的影响。采用小动物CT评估移植肺影像学表现,HE染色观察镜下移植肺组织病理学改变。结果进一步改进了小鼠原位肺移植模型的建立方法,即采用LPD液经肺动脉顺向加经肺静脉逆向灌洗的方式进行肺灌洗;用20G、22G、24G套管分别吻合支气管,肺静脉和肺动脉;用小潮气量高频率通气方案(呼吸频率150次/分,潮气量0.3ml)在手术期间对供受体进行机械通气。结论经过适当的学习曲线后,能过标准化、可重复的建立小鼠原位左肺移植模型。通过对供受体体重匹配,供肺灌洗方式,肺保护液类型,吻合套管尺寸,呼吸机参数设置等因素的调整,能进一步优化小鼠原位左肺移植模型的建立。
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