【摘 要】
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肾脏缺血再灌注性损伤(IRI)是引起急性肾功能不全(ARF)的主要原因之一,也是造成早期肾脏移植功能障碍的主要原因之一。尽管目前治疗技术有了明显的进步,但是与ARF有关的死亡率仍然
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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肾脏缺血再灌注性损伤(IRI)是引起急性肾功能不全(ARF)的主要原因之一,也是造成早期肾脏移植功能障碍的主要原因之一。尽管目前治疗技术有了明显的进步,但是与ARF有关的死亡率仍然很高,近50年来未明显降低。经初步实验筛选发现中药QC具有显著的防治肾脏IRI的活性。目的:筛选QC抗IRI活性的有效部位,稳定制备工艺,以便用于临床预防和治疗缺血性ARF,改善移植肾脏功能。方法:1.以95%乙醇、60%乙醇以及水依次对原药材进行浸提,醇沉法进一步分离其水提取产物,分别获得提取产物F1、F2、F3以及水溶性提取产物S1、S2。2.雄性SD大鼠24只随机分为4组,各组分别给予生理盐水、F1药液、F2药液、F3药液灌胃,剂量1ml/100g,每日早晚各一次,连续灌胃三日。第4日晨灌胃1h后,建立右肾切除,左侧肾蒂夹闭45min,再灌注24h的IRI模型,再灌注24h取血测定血尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)。3.雄性SD大鼠18只随机分为3组,各组分别给予生理盐水、S1药液、S2药液灌胃,剂量1ml/100g,每日早晚各一次,连续灌胃三日。第4日晨灌胃1h后,建立右肾切除,左侧肾蒂夹闭45min,再灌注24h的IRI模型,再灌注24h取血测定血尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)。肾脏切片做HE染色,比较肾脏病理变化。4.苯酚-硫酸比色法测定S1多糖含量,考马斯亮蓝法测定S1蛋白质含量。5.以水提取过程中的加水量、煎煮时间和煎煮次数为优选因素,采用L9(34)正交设计方案制备S1,并测定不同水平组合下的S1产率和多糖含量。不同浓度水提取液醇沉制备S1,测定S1的产率和多糖含量。结果:1.与病理对照组比较,S1显著降低大鼠缺血再灌注24h后的BUN、Cr水平(P<0.05),减轻肾脏组织的病理损伤。2.S1多糖含量为55.33%,蛋白质含量为1.02%。3.煎煮时间和煎煮次数对S1产率有显著影响(P<0.01),水提取液浓度对S1产率有影响(P<0.05)。结论:QC抗IRI的有效部位为QC经水提醇沉所得产物S1,其主要成分为多糖,最佳的制备工艺为:加水量10倍、煎煮时间1.5h、煎煮次数3次、水提取液浓度1g/ml。
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