【摘 要】
：
B-Raf（BRAF）基因是MAP激酶信号下游最强的激活剂。BRAF基因体细胞点突变（V600E）是甲状腺乳头状癌（PTC）最常见和最特异的单核苷酸突变（SNV）,可作为肿瘤诊断、监测和靶向治疗等重要生物标志物。然而,目前常用的细胞学检测方法（细针穿刺活检（FNAB））不能对其进行明确的诊断,而分子诊断方法（如PCR和测序）虽然是检测V600E突变的有效补充,但是在诊断时间、灵敏度和用户友好性方面
论文部分内容阅读
B-Raf（BRAF）基因是MAP激酶信号下游最强的激活剂。BRAF基因体细胞点突变（V600E）是甲状腺乳头状癌（PTC）最常见和最特异的单核苷酸突变（SNV）,可作为肿瘤诊断、监测和靶向治疗等重要生物标志物。然而,目前常用的细胞学检测方法（细针穿刺活检（FNAB））不能对其进行明确的诊断,而分子诊断方法（如PCR和测序）虽然是检测V600E突变的有效补充,但是在诊断时间、灵敏度和用户友好性方面均有一定的缺点。因此,我们开发了一种基于滚环扩增（RCA）和CRISPR/Cas14a的检测策略,用于甲状腺细针活检样本中高度特异性检测BRAF V600E突变。我们首先设计了一个挂锁探针来识别和触发随后的连接酶链反应（LCR）。并且由于Taq DNA连接酶高保真连接的特点,在BRAF V600E突变存在的情况下产生了大量的环形挂锁探针,随后通过RCA反应产生重复的长单链DNA。获得的扩增子是触CRISPR/Cas14a反式切割的激活剂。CRISPR/Cas14a在识别单碱基突变的ss DNA方面具有出色的性能,从而显著提高了突变鉴别的特异性。在最佳条件下,我们的策略可以识别低至0.307 fM的BRAF V600E突变,从并且在1 fM到10 pM线性范围内具有良好的线性。另一方面,所设计的双重识别策略使本方法对SNV的检测具有极好的特异性。此外,我们的方法已成功应用于鉴定临床细针穿刺样本中的BRAF V600E突变,证明了本方法具有超特异性鉴定低丰度BRAF V600E突变的巨大潜力,为癌症的诊断和治疗提供了一种新的辅助方法。
其他文献
为探究GHRL基因多态性对鸡生长性状的影响，寻找有利的遗传标记位点，试验以黔东南小香鸡为研究对象，采用GHRL基因外显子PCR扩增方法筛选单核苷酸突变位点，并分析其与生长性状的关联性。结果：在黔东南小香鸡GHRL基因第2外显子发现1个g.319A＞C突变位点，处于启动子区5’调控端，卡方适合性检验表明该位点满足Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。将g.319A＞C所对应的不同基因型分
＜正＞《中国心血管健康与疾病报告2019概要》显示,目前我国心血管病患病率仍处于上升阶段,推算心血管病现患人数3.3亿,其中冠心病1100万例[1]。为做好冠状动脉粥样硬化性心脏病（以下简称冠心病）分级诊疗和康复医疗工作,国家卫生行政主管部门下发了《关于印发冠状动脉粥样硬化性心脏病和脑血管疾病分级诊疗技术方案的通知》（国卫办医函[2016]1424号）和《关于印发加快推进康复医疗工作发展意见的通知
近几年，随着我国高校毕业生人数逐年增加，对高校毕业生的管理工作带来了巨大的压力，也对高校毕业生的就业方面造成了一定程度的影响。因此，就对高校学生的就业信息管理工作方面有了更加严格的要求。基于此，本文结合某个师范大学的实际情况，以数据挖掘技术为基础，采用B/S架构开发设计了一个基于数据挖掘技术的高校毕业生就业信息管理系统，以解决学校的毕业生就业信息管理问题。同时，也为高校毕业生就业管理工作提供一个更
【目的】试验旨在研究肌球蛋白重链3（myosin heavy chain 3,MYH3）和肌球蛋白重链13（myosin heavy chain 13,MYH13）基因遗传变异对猪肉质性状的影响。【方法】利用北京黑猪背最长肌样本进行肉质性状（肌内脂肪（intramuscular fat, IMF）、水分、滴水损失、酸碱度（pH）、肉色L*值、肉色a*值和肉色b*值）表型数据的测定。利用PCR和Sa
为获得花椒根腐病菌腐皮镰孢菌Fusarium solani的优良拮抗菌株，本研究以健康花椒侧根为拮抗菌来源，采用组织分离法获得花椒根部内生真菌，通过平板对峙法筛选出1株对病原菌具备明显拮抗作用的真菌HB21-1，平板抑制率为61.00%，其无菌发酵滤液抑制率为41.24%，可致腐皮镰孢菌菌丝出现皱缩膨胀、孢子畸形现象，经形态学和分子生物学鉴定为草酸青霉Penicilium oxalicum。盆栽试
财务信息的真实性和质量是资本市场信息披露中最重要的部分,其对于资本市场的健康运转起着关键性作用,虽然理论界对于资本市场中上市公司财务舞弊行为已经做出了大量研究,我国政府监管部门也一直都在致力于规范和完善监管制度,加大监管处罚效率和力度,推动资本市场健康发展,但是上市公司财务舞弊事件依旧迭出不穷。近年来,上市公司舞弊手段愈发隐蔽、复杂,具有创新性等特点,给资本市场、广大投资者、债权人以及其他利益相关
＜正＞本文围绕数据资产计量属性深入探究，以某大数据企业作为研究对象，阐述现阶段数据资产会计计量存在的不足之处，并提出具有针对性的解决措施：利用公允价值和历史成本等计量模式，做好数据资产的初始计量与后续处理，以此保证企业实现账面价值的准确调整，使数据资产价值完整呈现，切实满足会计信息的相关性要求，为企业的战略决策提供数据支持。
在基础教育阶段，为培养学生的综合素养，美术作为跨学科性学科在研究性学习板块起到了重要作用。借助应用美术的创作，能够整合并输出研究性的学习内容，培养学生的自主学习能力与综合实践能力。由于研究性学习的跨学科性，基础教育阶段的美术教育需要将设计思维融入教学，培养学生的设计能力与跨学科意识，切实培养学生的综合素质。
落实课程改革的关键在于提升教师评价能力。为践行《深化新时代教育评价改革总体方案》，本文从教师评价能力理念的转变中，指出教师的评价活动需以学生为本，在评价过程中形成“教学——评价——改进”的闭环，从而使评价促进学生学习。教师需重点学习课程评价的关键内容，在主题化、系列化的研训中提升评价技能，提高教师问题诊断和整改的能力。教师进修学校要重点培训关键人群，为一线教师提供强有力的现实支撑，要在融合发展的实
除锈工艺广泛运用在船舶修造业,是船舶涂装工艺中不可或缺的步骤,也是公认的修造船行业中的高污染环节。在秉承“绿色造船,节能环保”的理念下,除锈工艺技术的提升显得尤其重要。以超高压水射流为代表的环境友好型技术,具有能耗低、污染小、高效、易于操作等优势,被人们所重视并在船壁大面积除锈中得以运用。对于超高压水射流成套装备,国内外众多学者、科研机构主要集中研发载体平台的机器人、专用高架车等,但关于喷头装置水