目前，猪胚胎的冷冻保存尚未取得突破性进展，冷冻程序需进一步改善。建立和完善猪胚胎冷冻体系，一方面可以为猪种质资源保存及濒临动物的保护提供新的途径；另一方面为加快繁殖新技术的应用及丰富发育生物学文库，具有重要的理论意义和实用价值。本研究旨在通过体外受精、孤雌激活和超数排卵等技术，建立简便、有效的猪胚胎生产技术体系，同时为优化和完善猪胚胎冷冻体系奠定基础。　　 猪卵母细胞孤雌激活试验表明，激活液中Ca2+浓度为0.10mM，电脉冲强度为1.2kV/cm时卵裂率（80.70％）和囊胚率（11.94％）效果最好；当Ca2+浓度达到0.50mM时，卵裂率（61.40％）和囊胚率（7.84％）都显著下降，退化率也显著增加，其他各组差异显著（P<0.05）。化学激活采用7.5μg/mL CB+10μg/mLCHX+2mM6-DMAP联合处理组卵母细胞激活后卵裂率（92.80％）和囊胚发育率（49.10％）最高，与其他各组差异显著（P<0.05）。以解冻后活力为0.3左右的冷冻精液进行体外受精试验，精子浓度以107/mL为宜；0.25ml细管冷冻精液IVF的卵裂率显著低于鲜精（P<0.05），但是囊胚率差异不显著（P>0.05）；在受精滴中（mTBM）中添加5mM的Caffeine，其卵裂率和囊胚率都有所提高，与对照组差异不显著（P>0.05）。　　 在猪的超数排卵试验中，通过注射PG+PMSG+hCG母猪的同期发情效果最好，12头试验母猪同期发情率为91.7％，平均采集胚胎数为19.2枚，与其他组别差异不显著（P>0.05）。另外，激素剂量大小直接影响超排效果，在PMSG剂量为1000IU，hCG为500IU时划非效果最好，9头母猪同期发情率达到了100％，当 PMSG剂量增加时，超排效果不随之提高。在合适的超排周期实施超排技术能达到达理想的效果，在发情周期的第14d、15d进行超排效果最好，其发情率和囊胚回收数均高于其他组别，差异不显著（P>0.05）。　　 本试验系统的比较了不同的冷冻方法、冷冻预处理方案以及冷冻载体对卵母细胞和胚胎冷冻效果的影响。三种不同的冷冻载体即开放式拉长细管法（Open-pulled straws，OPS）、细管法（Straw）和冷冻环法（Cryo-loop vitrfication，CLV），结果表明，CLV法冷冻卵母细胞和胚胎效果较好。冷冻-解冻胚胎培养24小时后，CLV法存活率达到86.70％，高于OPS法（83.80％）和Straw法（77.60％）；囊胚细胞数（56.3）也高于OPS法和Straw法，三者之间差异不显著（P>0.05）。卵母冷冻解冻后的卵裂率CLV法（7.22％）与OPS法、Straw法（4.85％、0％）相比差异显著（P<0.05）；形态正常率为（84.35％）及FDA染色存活率为（80.00％）与其他各组差异显著（P<0.05）；经紫杉醇和CB预处理后的卵母细胞其形态正常率分别为（87.94％，84.89％）与对照组无显著差异（P>0.05）；经CB处理或者CB处理+离心极化等操作再进行玻璃化冷冻，其冷冻效果不明显，与对照组之间差异不显著（P>0.05），经去脂操作再进行玻璃化冷冻，其形态正常率和染色存活率都明显低于对照组差异显著（P<0.05）。对胚胎进行透明带薄化处理（0.50％链蛋白酶10 s），虽然对胚胎存活率没有显著影响，但能显著提高囊胚细胞数（60.1）与对照组（46.6）相比差异显著（P<0.05）。