目的:中药破壁饮片是通过现代粉碎技术将传统中药饮片加工至D90<45 μm(300目以上)的粉体,经无添加成型剂专利技术制成的30～100目的颗粒状饮片,由中山市中智药业集团有限公司自主研发而成,是继传统饮片、配方颗粒之后的创新中药饮片。其特点主要是:均匀性高、药材利用率高、应用方便快捷、全成分保留。破壁饮片自上市以来受到了广大消费者的欢迎,同时也受到国内外专家的关注。其中黄芪破壁饮片是目前销量前三位的品种之一,具有很高的经济价值和较好的市场前景,为公司的重点产品。黄芪是我国最古老的补中益气药之一,具有补气升阳、益卫固表、托毒生肌和利水退肿等功效。现有研究表明,黄芪破壁饮片与传统饮片的物质基础一致,且安全有效。但目前仍缺乏对其生物利用度、稳定性等基础研究的数据。本研究拟从粒径选择、均匀性、稳定性、溶出量、生物利用度等五方面对黄芪破壁饮片进行研究,为黄芪破壁饮片科学研究提供基础数据,并与传统饮片进行比较,为评价黄芪破壁饮片的质量及特点提供原始依据,也为其他品种开展相关研究提供参考。方法:1.采用气流粉碎机制备不同粒径的黄芪破壁粉(破壁饮片的中间体),对其粒径、显微结构、流动性、吸湿性、有效成分含量等进行考察。2.在相同来源(即:制备破壁饮片所用的传统饮片与本试验散装传统饮片为同一批次)黄芪破壁饮片、散装传统饮片的不同位置分别取样10份,测定其中5种有效成分(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素)的含量,同时测定10份市售黄芪小包装传统饮片有效成分含量,考察各成分的含量均匀性情况。3.以外观、水分、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷含量为指标,通过影响因素试验、加速稳定性试验和长期稳定性试验考察黄芪破壁饮片、破壁粉、传统饮片的质量稳定性。4.通过正交实验确定黄芪破壁饮片和传统饮片最佳煎煮料液比、煎煮次数、煎煮前浸泡时间以及破壁饮片冲泡最佳水温、料液比以及冲泡次数,比较不同时间点煎煮液/冲泡液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素5种有效成分的含量差异。5.破壁饮片混悬液与传统饮片煎煮液均以2.3 g生药/kg,4.6 g生药/kg,7.0 g生药/kg三个剂量灌胃给药大鼠,采用UPLC-QQQ-MS检测给药后大鼠血浆中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素血药浓度,绘制药时曲线,采用DAS3.2.6软件计算药动学参数,比较破壁饮片和传统饮片的相对生物利用度。结果:1.随着粒径的减小,黄芪破壁粉的比表面积、吸湿性、有效成分溶出含量增加,流动性、收率呈降低趋势。2.散装传统饮片中五种成分的含量最大测得值与最小测得值的比值在1.59-4.60倍之间,整体RSD值在12.44%-62.69%之间,其中黄芪甲苷含量测得值差距最大,为4.06倍。小包装传统饮片中五种成分最大测得值与最小测得值的比值在1.24-2.60倍之间,整体RSD值在8.46%-20.14%之间,其中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测得值差距最大,为2.60倍。破壁饮片中五种成分最大测得值与最小测得值的比值在1.07-1.13之间,整体RSD值在2.55%-3.45%之间,其中毛蕊异黄酮含量测得值差距最大,为1.13 倍。3.影响因素试验条件下,高温和高湿对三种饮片的水分和毛蕊异黄酮葡萄糖苷影响均较大,毛蕊异黄酮葡萄糖苷下降最多的为破壁粉,综合分析3种状态黄芪的稳定性为传统饮片≈破壁饮片>破壁粉。加速稳定性试验条件下,市售PE袋包装黄芪传统饮片和破壁粉含水量逐月上升,毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量逐月下降,至第六月均下降至合格限以下,市售铝箔袋包装破壁饮片外观、有效成分含量均保持稳定,综合分析稳定性为破壁饮片(市售包装)>传统饮片(市售包装)>破壁粉(市售包装)。长期稳定性试验条件下,3种状态黄芪的有效成分含量与0月相比均无显著下降,相较而言,传统饮片和破壁粉含水量上升较多,综合分析稳定性为破壁饮片(市售包装)>传统饮片(市售包装)>破壁粉(市售包装)。4.黄芪破壁饮片煎煮5-10min(煎煮前不浸泡,料液比为1:50,煎煮2次)其有效成分含量已达到传统饮片煎煮30 min(煎煮前浸泡30 min,料液比为1:50,煎煮3次)的含量;冲泡条件下有效成分溶出的量为传统饮片煎煮液的80-90%。5.以传统饮片作为参比制剂,高剂量条件下破壁饮片黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素生物利用度分别提高了 56%,81%,14%,78%,94%,中剂量组条件下分别提高了 167%,79%,46%,141%,78%,低剂量组条件下黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷分别提高了 120%,23%,26%。结论:1.适度的微粉化能促进黄芪有效成分的溶出,然而粒径太小,收率过低难以满足生产需求,实际生产过程中应综合考察优选最佳粉碎粒径。2.破壁饮片物质基础的均匀性高于传统饮片,有利于质量控制和保证临床疗效。3.为保证质量稳定,建议对PE袋市售包装黄芪传统饮片在室温条件下的储存时间进行规定并标示。黄芪传统饮片制备成破壁粉后,无论包装与否、室温或是高温高湿的条件下性质均不稳定,因此黄芪破壁粉在储存中应进一步选择合适的包装材料,并确认符合要求的储存条件及规定储存时间。由黄芪破壁粉制备的黄芪破壁饮片,能够解决黄芪破壁粉因比表面积大而导致的外观性状不稳定问题,复合铝箔袋包装进一步隔绝了空气和水分,避免其吸潮和氧化,在加速和长期稳定性试验条件下(12个月内)产品质量稳定可控,仍需进一步开展长期试验考察其相关指标,确认黄芪破壁饮片的合理有效期。4.黄芪经过破壁处理后可以免去煎煮前浸泡时间,减少煎煮时间、次数,显著提高煎煮效率,提高有效成分溶出速率;此外,冲泡条件下破壁饮片有效成分可以大部分溶出,说明经过细胞破壁处理后,黄芪药物利用率大幅度提高,为黄芪饮片提供了更为便捷的临床应用方式。5.黄芪破壁饮片混悬液中主要成分的生物利用度显著优于传统饮片煎煮液。