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垂丝海棠(Malus halliana)原产我国西南、中南、华东等地,属于蔷薇科苹果属植物,又称海棠花、垂枝海棠、解语花等,落叶小乔木,花期3-4月,开花时节花蕾绽放、花色艳丽,花梗柔软下垂,宛若少女纤纤细肢,花姿优美,深受人们喜爱,古人称之为“花中神仙”,其干在老化和风蚀后,苍虬蜿移,曲如龙游(刘志强2004),相对于花的美艳又别有一番趣味,其生性强健,栽培容易,在园林绿化中应用广泛。除具有园林观赏价值外,垂丝海棠还具有一定的食用和药用功能,因而引起相关行业的极大重视,如何快速大量繁殖垂丝海棠优质苗木满足其逐年增加的市场需求成为重点(许晓岗2007)。目前,国内对垂丝海棠的研究多集中在栽培方面(李晓东2002;王嘉祥2005),其繁殖多采用扦插、嫁接方式(陈相国2003),成活率低,繁殖系数小不能满足生产需要,严重限制了垂丝海棠苗木的发展,为了满足市场需求,可以采用组织培养来加快其生长和繁殖速度。垂丝海棠属于木本花卉,对其进行组织培养难度较大,目前对垂丝海棠组织培养的研究较少(张庆田2007),因此,本试验从外植体消毒建立无菌体系到研究离体快繁技术和愈伤组织培养,再到诱导生根和驯化移栽,一系列研究为垂丝海棠组织培养技术提供了系统依据,具体结果如下:1.外植体消毒:每年4-8月取材的幼嫩外植体消毒灭菌效果最好,消毒效果由好到劣依次为幼嫩单芽茎段>幼嫩叶片>花瓣,其中茎段的最佳消毒处理为:75%酒精30s+0.1%HgCl2消毒6min,叶片的最佳消毒处理为:75%酒精30s+0.1%HgCl2消毒8min,花瓣的最佳消毒处理为:75%酒精30s+0.1%HgCl2消毒6min。2.离体快繁培养:垂丝海棠长度为1.0-1.5cm的半木质化茎段出芽率最高为80%;正交试验筛选出垂丝海棠芽诱导的最佳培养基及激素浓度配比为WPM+6-BA1.Omg/L+NAAO.5mg/L,启动率为86.67%。芽增殖继代培养的最佳培养基及激素浓度配比为MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.5mg/L,垂丝海棠芽继代增殖培养添加1.0g/L的AC、lmg/LGA3有助于促进芽的增殖、伸长生长。3.愈伤组织培养:垂丝海棠茎段直插或平卧、叶片近轴面朝上接种方式有助于提高出愈率;暗培养出愈时间较短,并且愈伤组织结构更紧实;诱导培养基中最好添加30g/L的蔗糖;愈伤诱导的最佳培养基及激素浓度组合为:MS+6-BAO.5mg/L+2,4-D0.5mg/L,出愈率为95%。愈伤组织增殖以NAA为生长素效果好于以2,4-D为生长素,因此垂丝海棠愈伤组织增殖的最佳培养基及激素浓度组合为:MS+6-BA2.Omg/L+NAAO.6mg/L。愈伤组织分化芽的最佳培养基及激素浓度组合为:MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.8mg/L,分化率为88.33%。4.生根诱导:垂丝海棠诱导生根以1/2MS+IBA0.5mg/L为最佳培养基及激素浓度组合,平均根数为5.78条,根粗壮、无愈伤,生根率为72.67%;AC浓度1.0g/L对促进垂丝海棠组培苗生根最有利,浓度过高反而会对生根不利。5.炼苗移栽:组培苗移栽会受到很多因素影响,试验结果:不开瓶口自然光3d+开瓶口室内3d是最佳炼苗方式;选择玻璃烧杯覆盖移栽小苗,移栽成活率高达80%;每年的春季4月份是垂丝海棠最佳移栽时期,移栽成活率为85%;蛭石:腐殖土:河沙(2:3:1)配比的栽培基质生根苗生长最好,移栽存活率为90%,小苗移栽后选择透光率为60%的遮阴处理方式,垂丝海棠生长更好,存活率更高。