【摘 要】
：
再生医学是研究修复、替代和重生人体受损组织及器官的学科,是目前临床医学研究的热点。干细胞因其拥有的自我更新和分化潜能的双重能力而被认为是再生医学研究中必不可少的部分。羊水干细胞（Amniotic fluid stem cell,AFSC）代表了一种新兴的干细胞来源,它可能具有胚胎干细胞和成体干细胞的中间特征,既有良好的增殖能力和分化潜能,又不会有伦理问题和致瘤性,并且尚未报道具有明显免疫原性,这些
论文部分内容阅读
再生医学是研究修复、替代和重生人体受损组织及器官的学科,是目前临床医学研究的热点。干细胞因其拥有的自我更新和分化潜能的双重能力而被认为是再生医学研究中必不可少的部分。羊水干细胞（Amniotic fluid stem cell,AFSC）代表了一种新兴的干细胞来源,它可能具有胚胎干细胞和成体干细胞的中间特征,既有良好的增殖能力和分化潜能,又不会有伦理问题和致瘤性,并且尚未报道具有明显免疫原性,这些优势使之成为再生医学领域的研究焦点之一。本论文收集了怀孕食蟹猴的羊水并从中分离出羊水细胞,在体外进行培养,筛选并优化了培养体系,同时对培养的细胞进行mRNA水平和蛋白水平上的鉴定,并且给予其特定的诱导条件对其分化能力进行检测,经分析证明本论文获得了食蟹猴羊水干细胞系。结果如下:1)食蟹猴羊水干细胞的分离培养通过羊水穿刺获得怀孕8周龄以上食蟹猴羊水,离心收集得到羊水细胞,加入培养基接种到细胞板上,采用贴壁法和连续传代的方法获得形态均一、性质稳定的成纤维样细胞,初步建立3株食蟹猴羊水干细胞（cmAFSC）。对基础培养基及血清浓度进行筛选,得到最适合cmAFSC的培养体系。对第十代细胞进行MTT细胞增殖检测,细胞两天后即进入指数增长期,到第8天生长开始平缓,表现出较强的增殖能力。对细胞进行冻存和复苏实验,结果表明细胞经过冻存和复苏仍能保持良好的扩增能力。目前cmAFSC已传20代以上。2)食蟹猴羊水干细胞的分子标记鉴定通过RT-PCR对体外培养的cmAFSC进行mRNA水平上的鉴定,发现细胞表达胚胎干细胞表面标志物Oct-4和Nanog,也表达间充质干细胞标志物CD44、CD90,不表达造血干细胞标志物CD34。通过免疫荧光进行蛋白水平上的鉴定,证实cmAFSC表达干细胞标志基因Oct-4和SSEA4。3)食蟹猴羊水干细胞定向分化能力研究使用特定的诱导培养液,对体外培养的cmAFSC进行定向诱导为成骨细胞和脂肪细胞。经过3周的诱导时间,诱导为成骨细胞的细胞表面有钙盐沉积,经过茜素红染色发现钙结节被染成红色;诱导为脂肪细胞的细胞核周围有脂滴,通过油红O稀释液染色发现脂滴被染成橘红色。通过对成骨细胞的特异性蛋白osteopontin和脂肪细胞特异表达过氧化物酶增殖激活受体PPAR-γ的表达分析证明了cmAFSC的分化。综上所述,本实验成功建立了食蟹猴羊水干细胞系,为其细胞生物学研究和替代治疗研究奠定基础。
其他文献
低秩优化问题在统计、控制、系统识别、信号与图像处理、金融以及量子计算等诸多领域中有着极其广泛的应用.本论文从秩函数的变分刻画入手,将这类带有组合性的优化问题等价转化为具有拟双线性结构且局部Lipschitz连续的优化模型,以此设计并研究了求解一般秩极小化问题和秩正则极小化问题的多阶段凸松弛法.首先,论文基于秩函数的变分刻画,分别将秩极小化问题和秩正则极小化问题等价表示为广义矩阵互补约束的数学规划问
在我国城镇化进程背景下,部分农村老人因为家庭、社会等因素,从熟悉的农村随子女迁入到陌生的城市,进入到新的环境中生活。在这个过程中,老人需要在一定程度上克服融入城市生活的种种困难。文章以海口市部分地区农村老人迁入城市后的社会融入为研究对象,分析其融入社会存在的问题及影响因素,提出有目的性、有针对性的措施及建议,为相关研究提供借鉴意义。
改革开放以来,我国农业发展进程中“小农户和大市场”的矛盾日益凸显。近年来农业电子商务快速发展突破了传统农产品交易渠道的限制,分散农户能直接对接大市场,减少了交易环节和交易成本,扩大交易范围,提高交易效率。本文对梅州市农业电子商务发展现状进行了实地调查研究,分析其发展特点与不足,并提出相关对策建议,因而具有重要的现实意义。本文基于前人相关研究基础和电子商务相关理论,利用层次分析法构建了农业电子商务发
农业、农村和农民问题是关系国计民生的根本问题,2004年以来,中央“一号文件”均以“三农”为主题,推动了传统农业向现代农业转型的进程。随着梅州市农业现代化进程加快,人力资源开发引起高度关注。如何解决农村人力资源总量大,剩余劳动力多的难题,实现人力资源合理配置,成为农村人力资源开发亟待研究的重要问题。因此,研究梅县区农村人力资源开发对优化人力资源结构,合理配置人力资源,实现劳动力充分就业有着重要的意
构树（Broussonetia papyrifera）为桑科构树属多年生落叶阔叶乔木,是一种多功能综合性树种。其嫩叶含有的植物蛋白为20%左右,具有很好的饲用价值。木本植物含有多种活性成分及抗营养因子。有研究表明,某些活性物质在促进生长、改善鱼体品质,提高非特异性免疫力和饲料利用率,抵抗病原菌感染等方面均有良好效果。发酵技术能提高构树的饲用价值。链球菌（Streptococcus spp.）病严重
3D打印是一种新兴的可以定制化、个性化制备所需不同复杂结构部件的技术。由于其定制化能力强,用3D打印技术来制备人工骨,可以按照不同的需求制备得到不同的人所适用的人工骨,甚至可以改变人工骨材料内部孔道结构、孔隙率等等,为细胞的生长创造更有利的条件。与此同时,通过一定条件下的药物负载来降低材料在体内可能带来的感染以及增强骨修复的作用。聚乳酸凭借其自身良好的生物相容性和力学性能成为3D打印复合材料中的主
笼养普通狨猴是一类比较重要的灵长类实验动物,其具有体型小、饲养费用低、实验操作方便、繁殖率高、生命周期短等生物特征。普通狨猴广泛应用在神经学、生殖生理学和行为学及肿瘤等研究,特别是其神经精神性疾病与人类疾病方面有许多相似性之处。在实验动物研究方面,目前已建立多种与运动发育相关的评估指标,然而其与神经发育之间相关性不甚明白;有关实验动物焦虑模型的研究仍然不足,本论文主要就这两方面开展普通狨猴研究。本
动物行为学是当前热门的研究课题之一。其中,灵长类动物的母婴关系和婴幼儿的运动行为发育方面有着重要的研究意义。通过研究灵长类动物的母婴关系和婴幼儿时期的一系列运动发展规律,可为动物婴幼年行为异常提供参考,也可为正常动物行为发育规律提供参考数据。其中食蟹猴是行为科学研究中重要的灵长类动物之一,而科学的饲养管理方法是获得理想实验食蟹猴的必要条件。因此,本论文结合5年的食蟹猴饲养管理经验的基础上,对食蟹猴
本实验旨在研究尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）幼鱼对辣木、桑叶、黄粱木、构树四种木本饲料的消化利用率,为四种木本植物在罗非鱼饲料中的科学应用提供根据。1.尼罗罗非鱼对四种木本饲料中营养物质的表观消化率。实验旨在探讨尼罗罗非鱼对桑叶、构树、辣木和黄梁木叶中粗脂肪、粗蛋白质、干物质、总能和氨基酸的表观消化率。实验采集华南农业大学林学院种植基地黄粱木、构树、辣木、桑叶,60℃烘干
苯巴比妥（Phenobarbital）作为催眠、镇静、抗惊厥、抗癫痫的医用药物,在临床上常用于治疗精神焦虑、失眠、癫痫、高胆红素血症等。由于苯巴比妥的镇静催眠效果较好,若添加在动物饲料中,可以提高牲畜体重,增加经济效益。但苯巴比妥对人体具有致畸、致癌等不良影响,因此各国均严禁食品动物生产养殖过程中出现苯巴比妥,食品动物和动物性食品中均不得检出。在药物残留检测领域,免疫学分析因其高效特异性、灵敏性及