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目的:本研究以活性氧传递均相发光免疫分析(LOCI)技术的AlphaScreen平台为基础,研发孕妇血清妊娠相关蛋白A(PAPP-A)的均相免疫检测体系,然后对此体系做方法学和临床评价。方法:本研究的检测体系包括受体微球(PAPP-A多克隆抗体标记)、生物素(PAPP-A单克隆抗体标记)、待测PAPP-A和供体微球,受体微球和生物素化抗体的最适浓度用棋盘滴定的方法加以确定,并进行试剂加样量、反应时间等实验条件的优化。在此基础上,得出拟合方程的标准曲线,用光激化学发光分析仪检测待测临床标本,所得光信号值带入拟合方程计算出PAPP-A浓度,然后对此检测体系进行方法学和临床评价。采用ELISACalc软件进行剂量-反应曲线数学模型及相关统计学分析。结果:本研究建立了孕妇血清PAPP-A活性氧传递均相发光免疫检测体系,并对其进行了实验条件的优化,并对该检测体系进行了方法学和临床评价,灵敏度达到了2.84mU/L;批内和批间精密度分别达到5.91%-7.94%和6.14%-9.69%;回收率在96.7%-100.3%,也符合临床检测的需求;特异性检测中,对血红蛋白的干扰率为8.37%(低值)和6.98%(高值),对总胆红素的干扰率为6.57%(低值)和9.23%(高值),对甘油三酯的干扰率为7.97%(低值)和9.38%(高值),说明该检测体系有着较强抗溶血、脂血和黄疸的能力;我们还对该检测体系是否发生Hook效应进行了考察,在PAPP-A含量达到8000mU/L时,未见Hook效应发生,线性范围为2.8mU/L-8000mU/L;在与时间分辨荧光分析法的相关性分析中,相关性达到了98.9%。结论:本检测体系检测性能良好,灵敏度、准确性、重复性、抗干扰能力等均较好,可用于定量检测孕妇血清PAPP-A,而且与时间分辨荧光分析法比较,步骤简洁、时间大大缩短、成本较低,进一步研发有望推广临床应用。