第一部分角膜移植术后泪膜稳定性变化的临床研究 目的：探讨角膜移植术后泪膜稳定性变化。方法：选取7例圆锥角膜患者，均行部分板层角膜移植术。分别于术前、术后1w、1m、2m、3m进行基础泪液分泌试验(SchirmerⅠtest，SIt)、泪膜破裂时间(Break-uptime，BUT)、荧光素(Fluorescien，F1)染色检查。结果：术后1w时SIt明显升高，与术前相比，有显著性差异(P＜0.01)，而后泪液分泌量逐渐减少，但术后1m的泪液分泌量仍多于术前，有显著性差异(P＜0.01)。术后3m时泪液分泌量下降至术前水平，与术前相比无显著性差异(P＞0.05)。术后各时间点BUT均短于术前，有显著性差异(P＜0.05)，术后各时间点间BUT比较则无显著性差异(P＞o.05)。并术后各时间点F1染色评分均明显高与术前，有显著性差异(P＜0.01)，术后各时间点间F1染色评分比较，无显著性差异(P＞0.05)。结论：角膜移植手术可影响泪膜的稳定性，这与植片保护液、手术创伤和眼液中防腐剂等对眼表面上皮组织的损伤均有密切关系。 第二部分角膜移植术后结膜杯状细胞变化的研究 目的：制备大鼠角膜移植模型，研究角膜移植手术后结膜杯状细胞变化。方法：建立SD-SD大鼠异体角膜移植模型及SD-Wistar大鼠角膜移植排斥反应模型，将试验动物分为3组。Ⅰ组为正常眼组，Ⅱ组为SD-SD大鼠同种异体角膜移植组，Ⅲ组为SD-Wistar大鼠同种异体移植组。对各组大鼠角膜植片存活情况、角膜透明性、角膜基质水肿情况、新生血管进行评分比较。于术后不同时间点(7、14、21、28天)取其全结膜，并应用印迹细胞学、HE、PAS染色技术检测各组结膜杯状细胞情况，进行分析比较。结果：1.术后2周Ⅱ，Ⅲ组排斥反应指数(ReiectionIndex，RI)分别为2.390.23、8.29±1.38，存在显著性差异(P＜0.01)。2.组织病理学检查，Ⅲ组急性排斥反应期，结膜充血、水肿较重，结膜杯状细胞数量明显减少，此时杯状细胞主要分布于穹隆部及近穹隆部睑结膜，球结膜杯状细胞少见；28d时结膜充血、水肿减轻，此时杯状细胞少见，仅见于穹隆部。Ⅱ组在整个观察过程中结膜无明显充血、水肿，杯状细胞始终存在，但随观察时间延长杯状细胞同样呈缓慢减少趋势，且以球结膜杯状细胞减少最为明显，其次为睑结膜及穹隆部结膜。形态学上早期无明显变化，细胞呈圆形或椭圆形，细胞核扁平，位于细胞底部，胞浆饱满。晚期部分杯状细胞可出现边界不清，细胞变小，萎缩等情况。3.观察期间各时间点印迹细胞学检测结膜杯状细胞发现，Ⅱ、Ⅲ组数量均少于Ⅰ组(P＜0.01)，Ⅱ、Ⅲ组内部比较，Ⅱ组数量多于Ⅲ组，有显著性差异(P＜0.01)。结论：1.角膜移植术后结膜杯状细胞出现体积变小，萎缩等形态学改变，免疫排斥反应发生时此形态学变化较早出现。2.角膜移植术后发生结膜杯状细胞受损、数量减小，免疫排斥反应发生后程度加重。3.角膜移植术后球结膜杯状细胞受损最为明显，其次为睑结膜及穹隆部结膜。