K562细胞是一株恶性程度较高的人红白血病细胞系，体外可在多种化学诱导剂的作用下向红系方向分化，出现红系表征，即停止分裂、表达珠蛋白基因产物、核固缩直至自然脱核等。其中，自然脱核是K562细胞向红系方向分化的一个重要指标。 细胞松弛素B(CB)是肌动蛋白聚合的抑制剂，能特异性地破坏微丝的组装。细胞在CB的作用下，微丝聚集受到抑制，细胞核与细胞质间的连接变得松散。Cater于1967年首先观察到CB能诱发体外培养的小鼠L细胞发生脱核作用，此后这一现象在许多种细胞类型中都得到了证实。经Prescott的改进，应用CB并用离心法可以制备大量的去核细胞(胞质体)与核体。 本研究观察到在体外培养的条件下，CB对K562细胞有诱导脱核作用，且这种作用与药物浓度呈正相关，并随着处理时间的延长而增强。同时CB对K562细胞生长增殖有明显抑制作用。 为进一步阐述CB作用的分子机制，我们首先应用限制性显示技术(RD技术)，结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术分离了K562细胞CB处理前后的cDNA片段，发现多个差异表达的基因片段，并将这些差异表达的基因进行克隆、测序，其中aquaporin 1基因与K562细胞红系分化调控密切相关。 同时，本研究利用RD技术构建了限制性cDNA文库，取其中一部分制备了含有277个cDNA探针的K562细胞基因表达谱芯片。分别提取CB处理前后的K562细胞总RNA，将两组等量的总RNA纯化为mRNA，反转录成cDNA后，应用限制性荧光标记法进行扩增标记，Cy3/Cy5荧光染料分别标记对照组/处理组cDNA，荧光标记的样品与已制备的K562表达谱芯片杂交后，扫描、分析两组荧光信号的强度和比值。实验结果表明，CB处理后的K562细胞共有18个基因表达呈下调趋势(Cy3/Cy5＞2.0)，包括细胞增殖、信号转导、转录调节等相关基因。其中肿瘤转移相关基因(层粘连蛋白受体)和细胞信号转导基因(G蛋白)下调明显(Cy3/Cy5＞3.0)，故利用RT-PCR对这两个基因的表达进行了验证。综上所述， 本研究利用基因芯片高通量、快速、敏感K562细胞基因表达变化进行了初步的研究，为阐明肿瘤，并可为临床