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研究背景 糖尿病及其并发症是全球关注的重要难题。但是目前对于糖尿病的管理和监测主要依赖血糖相关指标。相同水平血糖的患者依然可能存在不同的结局。补体C3的异常表达与激活是和糖尿病发生、发展最密切的指标之一,且在糖尿病患者中补体C3会在血清中形成特异性复合物。然而目前临床上缺少补体C3糖尿病相关活化的指标。研究目的 1.研究糖尿病相关C3复合物和糖尿病各项指标关系,评价其应用可能;2.建立补体C3酶促糖基化鉴定方法,分析其与糖尿病各项指标关联。研究方法 本文纳入了既往北京协和医院的两项病例对照研究的样本进行研究。1)第一及第二部分:用Native-PAGE分离患者血清中的糖尿病相关C3复合物(T1及T2),用线性回归等统计方式研究其与糖尿病各项指标关系;用ROC曲线分析其用于鉴别各类型糖尿病的关系;用介导分析研究复合物所反映的C3激活在BMI升高所导致的胰岛素抵抗中的作用。2)第三部分:用SDS-PAGE分离补体C3β,用g-C3N4富集补体C3β的糖肽并进行分析。研究结果 1)1型糖尿病(T1D)、2型糖尿病(T2D)患者的血糖指标及炎症指标显著高于MODY2及健康对照。MODY2与对照的炎症状态无明显差异。在矫正年龄、性别、BMI后,糖尿病相关C3复合物中的T2含量比例(T2%)显著与胰岛素抵抗、血糖指标负线性相关(p均<10-3),而T2%与血糖指标的关系建立在和胰岛素抵抗的相关性上;2)ROC分析提示T2%可很好区分T2D与MODY2或健康人群区(p均≤0.001)。逻辑回归提示:矫正年龄、性别、BMI和HbA1c时,T2%仍对区分T2D和MODY2有统计学意义;3)介导分析显示,矫正年龄、性别后,T2%的下降显著介导了 35%BMI和胰岛素抵抗的关系(p=0.024);4)本实验建立的C3糖基化测定方法可以相对稳定测定峰度较高的11种糖型;5)在矫正年龄、性别时,C3β链上G4,G10和G11的上调与更高的血糖水平、胰岛素抵抗显著相关。结论:我们首次发现由补体C3构成的一种复合物可以很好评估非T1D患者的胰岛素抵抗情况。这种复合物含量的改变在BMI升高所致的胰岛素抵抗中起到了重要作用。本文所阐述的C3糖基化测定方法适合测定C3修饰峰度较高的糖型。C3β链上糖基化修饰的改变在糖尿病中发挥重要作用。