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目的:(1)明确白细胞介素27(Interleukin 27,IL-27)及其特异性受体WSX-1在正常妊娠和子痫前期(Preeclampsia,PE)病人中是否存在差异表达;(2)研究IL-27刺激滋养细胞后所发生的炎症效应;(3)探讨IL-27及其下游信号通路在子痫前期发病机制中的可能作用,为子痫前期的治疗提供潜在新靶点和理论基础。方法:(1)ELISA检测IL-27在正常妊娠和PE病人的血清中是否存在差异表达;(2)免疫组化法检测IL-27及其特异性受体WSX-1在正常妊娠和PE病人的胎盘组织中是否存在差异表达;(3)采用RT-PCR和Western Blotting定量检测IL-27的受体WSX-1和gp130在滋养细胞HTR8/SVneo中的表达情况;(4)在滋养细胞HTR8/SVneo中采用RT-PCR筛查IL-27作用的下游炎症因子;(5)采用RT-PCR和Western Blotting分别在RNA和蛋白水平定量验证IL-27作用的下游靶向炎症因子;(6)使用ELISA筛查与IL-27协同作用的经典炎症因子;(7)筛查IL-27作用的下游信号通路,并用Western Blotting在蛋白水平加以验证。结果:(1)正常妊娠和PE病人的血清中IL-27的表达没有差异;(2)免疫组化法证实IL-27及其特异性受体WSX-1能在胎盘组织中正常表达,且PE组较正常对照组表达增加;(3)IL-27的受体WSX-1和gp130在滋养细胞HTR8/SVneo中均有表达;(4)在滋养细胞HTR8/SVneo中IL-27刺激下游炎症因子CXCL10和IL-6的释放呈时间依赖效应;(5)TNF-α能够明显加强由IL-27引起的CXCL10和IL-6的释放;(6)IL-27主要通过激活phosphatidylinositol 3-OH kinase-AKT(PI3K-AKT),p38 mitogen-activated protein kinases(p38MAPK)和Janus kinase and a Signal Transducer and Activator of Transcription(JAK/STAT)信号通路上调下游炎症因子CXCL10和IL-6。结论:(1)IL-27通过调控滋养细胞释放炎症介质CXCL10和IL-6可触发过度性炎症反应从而参与PE的发生;(2)TNF-α能与IL-27协同作用引起过度性炎症反应;(3)IL-27主要通过激活PI3K-AKT,p38MAPK和JAK/STAT信号通路引起CXCL10和IL-6的释放,致使过度性炎症反应的发生;(4)分别使用PI3K-AKT,p38MAPK和JAK/STAT信号通路的特异性抑制剂LY294002,SB253580和AG490可明显缓解由IL-27刺激引起的过度性炎症效应,从而可能为子痫前期的治疗提供新的思路和靶点。目的:(1)比较足月分娩未启动(term not in labour,TNL)和足月分娩启动(term in labour,TL)时全层胎膜(包括羊膜,绒毛膜和蜕膜)组织匀浆及其上清对外周总白细胞的趋化效应;(2)分别筛选TNL和TL胎膜组织匀浆及其上清中引起白细胞趋化的趋化因子;(3)对靶向趋化因子的趋化能力进行特异性鉴定,挑选出最终激活的趋化因子,为早产的诊治提供潜在的新靶点。方法:(1)建立培养胎膜组织的体外模型;(2)用LMA(Leukocyte migration assay)比较TNL和TL胎膜组织匀浆及上清的趋化活性,并使用特异性抗体标记趋化后的外周白细胞经流式细胞仪检测后予以白细胞亚型分类,并在TNL和TL之间进行比较;(3)采用Proteome Profiler分别筛选TNL和TL胎膜组织匀浆及上清中的激活趋化因子;(4)Quantitative Real-Time PCR(q RT-PCR)和Bio-PlexTM分别从m RNA和蛋白水平验证激活的趋化因子;(5)Bio-PlexTM定量检测TNL和TL病人外周血清中靶向趋化因子的表达水平;(6)LMA验证使用生理剂量的靶向趋化因子的人重组蛋白是否具有趋化活性,及其特异性中和抗体能否减弱这种趋化活性。结果:(1)成功建立了胎膜体外培养模型;(2)经胎膜匀浆及胎膜上清刺激后TL孕妇较TNL孕妇迁移的外周总白细胞数量增加,特别是粒细胞和单核细胞(P<0.05),但白细胞亚型比重没有发现明显差异(P>0.05);(3)经Proteome Profiler初步筛选与分娩相关的激活趋化因子包括CXCL1,CXCL8,CXCL10,CCL2,CCL5和CCL21;(4)RNA和蛋白水平的定量检测确认CXCL1,CXCL8和CCL21在TNL和TL孕妇胎膜匀浆及上清表达中存在统计学差异(P<0.05);(5)比较TNL和TL孕妇血清中这些靶向趋化因子的的表达水平并未发现明显差异(P<0.05);(6)TL病人外周总白细胞能够被与上清浓度相似的人重组CXCL1和CXCL8蛋白趋化并呈明显的剂量依赖效应(P<0.05),分别加入CXCL1和CXCL8中和抗体后能够明显抑制此趋化效应(P<0.05),而在胎膜组织匀浆中未观察到该现象(P>0.05)。结论:(1)成功建立了模拟分娩启动时胎膜介导外周白细胞趋化的体外模型,有助于未来对分娩生理机制及早产相关机理的研究;(2)证实分娩启动时胎膜趋化白细胞的数量明显增加,特别是粒细胞和单核细胞,可能在分娩启动的过程中发挥重要作用;(3)经过全面系统地筛查证实由胎膜分泌的CXCL1和CXCL8在介导白细胞浸润胎膜组织触发分娩启动的过程中发挥重要作用,有望成为未来早产诊治的新靶点;(4)胎膜组织中仍存在除CXCL1和CXCL8之外的某些未知的趋化因素参与了分娩的启动。