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根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)ORF5基因的核苷酸序列设计3对特异性引物，从重组质粒pMD-ORF5中扩增去除ORF5基因中包括全部信号肽在内的N端跨膜区(28 residues)和A表位基因，保留B表位基因。另外将该跨膜区和ORF5基因中部跨膜区(60 residues)同时删除。改造后的ORF5基因分别命名为ORF5-1和ORF5-2。将2个基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)，构建重组质粒pET-ORF5-1和pET-ORF5-2，转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，经IPTG诱导表达和SDS-PAGE电泳分析，ORF5-1和ORF5-2基因获得融合表达，表达量分别为12.2％和39％。结果证明删除双跨膜区能明显提高ORF5基因的表达量。经western-blot分析，融合蛋白具有一定的免疫学活性。表明摘除跨膜区对该蛋白的抗原性影响不大。 比较猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因的原核表达质粒pET-ORF5-1和pET-ORF5-2在体外表达效率以及体内的免疫效果，以期从中选出高效的猪繁殖与呼吸综合症病毒亚单位疫苗。应用His-bind树脂层析柱纯化重组GP5蛋白，将表达产物6P5-1和GP5-2纯化、复性并免疫6～8周龄小鼠，用间接ELISA法、微量血清中和法与MTT法检测小鼠血清中特异性抗重组蛋白抗体、血清中和抗体水平以及脾脏中淋巴细胞增殖功能。结果表明GP5-1和GP5-2蛋白刺激机体产生了较高水平的抗体滴度为1∶1600，但是经微量中和试验发现中和抗体均小于1∶4。不过两者均能诱导小鼠产生特异性淋巴细胞增殖反应，淋巴细胞增殖水平无显著差异，与对照组相比差异显著(P＜0.05)。 本研究探讨了提高PRRSV orf5 gene表达效率的方法，并证实删除跨膜区的GP5蛋白能很好的诱导小鼠体液免疫和细胞免疫，对今后深入研究PRRSV蛋白的结构和生物学功能以及研制针对PRRSV新型基因工程疫苗奠定了基础。