利用高通量测序技术检测蝉花内菌核、菌膜、生境土(包括菌际土、菌周1cm、2cm及5cm处土壤)及无蝉花生长区环境土的微生物群落组成,比较蝉花从内至外群落组成差异,分析内菌核、菌膜及菌际土中的核心微生物组、预测生态功能并分析土壤理化因子与蝉花内核心微生物组的相关性。利用柞蚕蛹代替蝉花虫草的自然寄主蝉若虫,从优质菌株筛选、接种方式、接种浓度、覆土时间及厚度5个方面进行蝉花的仿生态覆土栽培研究,研发了蝉花的仿生态覆土栽培技术,并在马尾松林及茶园下验证了栽培效果。本文得到以下研究结果:(1)蝉花生境土微生物群落多样性和丰富度显著高于蝉花内菌核和菌膜,在蝉花内菌核、菌膜和菌际土中分别检测到已知真菌43、58和260属,已知细菌341、291和308属,内菌核和菌膜的微生物群落组成相似,均存在多菌定殖现象。内菌核中优势真菌属为棒束孢属Isaria,优势细菌属为假单胞菌属Pseudomonas和沙雷氏菌属Serratia;菌膜中优势真菌为棒束孢属,优势细菌为假单胞菌属,丰度较高的还有鞘氨醇杆菌属Sphingobacterium、剑菌属Ensifer、氨基酸杆菌属Aminobacter;菌际土中丰度较高真菌为棒束孢属、被孢霉属Mortierella、白僵菌属Beauveria、隐球酵母属Cryptococcus、青霉属Penicillium,丰度较高细菌为酸杆菌门Acidobacteria及Xanthobacteria未知属和Bradyrhizobium属。内菌核中的假单胞菌和沙雷氏菌可能源于虫体自身,且可能参与了蝉花的侵染过程。(2)内菌核、菌膜和菌际土分别检测到核心真菌OTU 10、5、20个,共注释到11个生态功能群:外生菌根真菌、未定义腐生菌、动物病原菌群、真菌寄生菌群、枯枝落叶真菌群、粪生真菌群、内生真菌群、植物病原菌群、丛枝菌根真菌群、植物腐生菌群、木腐菌群。内菌核、菌膜和菌际土中分别检测到核心细菌OTU 26、12、56个,内菌核细菌群落主要为病原菌、氮循环、共生或寄生菌、化能异养、有机及无机化合物降解等功能菌;菌膜的细菌群落功能主要表现为氮循环、化能异养、有机及无机化合物降解;菌际土的细菌群落主要为碳循环、氮循环、化能异养、有机及无机化合物降解等功能菌。(3)PCA分析表明,土壤因子全氮(TN)、全磷(TP)和全钾(TK)为影响蝉花微生物群落的主要土壤理化因子。还发现内菌核、菌膜及菌际土中的棒束孢属与土壤TK呈负相关,与TP和总有机碳(TOC)呈正相关。(4)利用5×10~7个分生孢子/m L的蝉棒束孢悬浮液,注射接种蚕蛹,培养3 d后,转为覆土培养,覆土1 cm厚,继续培养35～45 d,可采收到子实体成熟的蝉花虫草。且该栽培方式获得的蝉花其多糖、腺苷、虫草素及甘露醇含量与野生蝉花相似,氨基酸含量显著高于野生蝉花。在马尾松林中栽培产子实体率为82±12%,在茶园下产子实体率为89±5%,表明该栽培方法可在自然环境下进行。本研究的仿生态覆土栽培方法可为蝉花侵染机制及其与土壤中营养元素转换等研究提供支撑。