目的：提取大蒜油，对其安瓿制剂稳定性进行观察；研究大蒜油对H．pylori的体外抑菌实验和体内动物根除治疗作用，探索新的理想的抗H．pylori药物。 方法：(1)采用有机溶剂提取、萃取法提取大蒜油：气相色谱／质谱法(GC／HS)联用鉴定大蒜油中二烯丙基三硫化物和二烯丙基二硫化物(主要抗菌成分)等成分；用GC法观察低温保存下的大蒜油安瓿制剂的稳定性。(2)运用H．pylori液体培养药敏试验倍比稀释法(简称液体倍比稀释法)检测大蒜油对云南菌株和标准菌株NCTC11639的最低抑菌浓度(MIC)。(3)用PCR方法检测29株云南H．pylori菌株的cagA基因及vacA基因；分离培养、鉴定、传代及保种云南cagA及vacA阳性H．pylori-小鼠适应株；用H．pylori-小鼠适应株建立H．pylori感染BALB／c小鼠动物模型；大蒜油治疗H．pylori感染小鼠，观察疗效及不良反应。 结果：(1)昆明产紫皮独头蒜的出油率为0.132％；所提取大蒜油中二烯丙基二硫化物、二烯丙基三硫化物(主要抗菌成分)在大蒜油中各占13.5％、14.8％；二烯丙基二硫化物三个月的监测时间中，每月内含量分别为13.4743％、13.3603％及13.8852％；二烯丙基三硫化物含量分别为14.8408％、14.9045％及14.2677％。(2)体外实验：大蒜油浓度为165μg／ml时对所有测试菌株均有抑菌作用(抑菌率为100％)；大蒜油浓度为82.5μg／ml时对大部份测试昆明医学院硕士研究生论文 菌株有抑菌作用(抑菌率为83.3%);大蒜油浓度为41.25pg/ml 时对一小部分测试菌株有抑菌作用(抑菌率为26.7%)。没有出现 耐药菌株。(3)对29株云南菌株进行了扩增，其中有86.2%(25/29) 菌株cagA基因阳性;29株云南双刃了盯了菌株中，共检出。cA 基因51而么51/伽lb、成城心、51加Ib子勿召和51而-五种组合，所 占比例分别为55.2%(16/29)、13.8%(4/29)、3.5%(l/29)、17.2% (5/29)和10.3%(3/29)。(4)4株‘臾勿及阳cA基因阳性菌株 混合液感染小鼠，感染率为33.3%(3/9);标准菌株NCTCll639 感染小鼠未成功，两者相比有显著性差异(P<0.05)。从己感染 H仍)Io ri小鼠胃内分离培养出的菌株传代3次后保种，成功培养 了万仍初ri·小鼠适应株。经用PCR扩增该适应株的姐‘刁和‘处叼 基因，证实了灌胃前后为同一具有相同拍c通和‘处洲基因的 H刃leri菌株。(5)经汉双厂了orz’--小鼠适应株灌胃4周后，病理 模型组10只感染的小鼠胃粘膜尿素酶试验、细菌学培养和组织 病理学检查均为阳性，感染率为100%(10/lO);正常对照组未见 汉刃了口厂了生长(O/10)，两者相比有显著性差异(P<0.05)。(6) 大蒜油治疗组大蒜油治疗l周后双刃了盯了清除率为6既(6/10)， l个月后根除率为7既(7/l0)，总的治疗率为65%(13/20)，治疗 过程中仅一只小鼠出现食欲减退，但治疗结束后很快恢复;正常 对照组未见双刃了口厂了生长(0/20);阴性药物对照组及损伤组均 见双刃Zorj生长(40/40)。大蒜油治疗H刃lori的疗效与阴性药 物对照组、损伤组及正常对照组比较均有显著的差异(P均 <0.001)。结论:(l)本研究用有机溶剂提取、萃取法从昆明产紫皮独头蒜中提 取大蒜油，其出油率为0.132%。大蒜主要抗菌成分含量很高，昆明医学院硕士研究生论文 其中二烯丙基二硫化物、二烯丙基三硫化物在大蒜油中各占 13.5%、14.8%.其安瓶剂型低温保存下抗菌成分稳定性好，可 较长期保存。(2)在体外试验中大蒜油在很低的浓度时就有明 显抑制万仍初ri菌株作用。(3)国内外首次成功地培养了植c刁 和‘臾洲基因同时阳性的云南H仍)Io ri翻LB/c小鼠适应株。(4) 在国内外首次成功地建立了云南H刃tori一小鼠适应株感染的 BALB/c小鼠动物模型。这种c己烤月基因和vacA基因同时阳性的 H刃IOri一小鼠适应株毒力强容易定植:可在普通饲养条件下建 立，即有利应用于云南地区H月川Ori的相关研究，又可节约研 究经费，易于推广使用。(5)本研究在国内外首次报道了大蒜 油体内根除万刃2口尸i治疗效果好，安全、无耐药性、价格低廉。 其安瓶剂型稳定，便于保存与携带。在临床上普遍推广应用， 有着不可估量的社会效益和经济效益。