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目的:通过观察细胞型朊蛋白(celular prion protein,Pr Pc)在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠和正常小鼠视网膜组织上的表达情况,分析Pr Pc与AD小鼠视网膜组织改变之间存在的关系,为下一步研究Pr Pc在AD视网膜退行性病变上的发病机制研究奠定实验基础,也为阿尔茨海默病的早期诊断和早期治疗提供一定的研究方向。方法:选取6月龄大小的双转基因(APP/PS1)阿尔茨海默病C57小鼠30只作为实验组,6月龄大小30只正常健康的C57小鼠作为对照组,雌雄各半,相同的饲养环境。将小鼠过量麻醉处死后,暴露眼球,分离睑结膜,剪断视神经取出眼球,在解剖显微下迅速的取出视网膜,将视网膜放入EP管内,液氮冻存。首先通过HE染色技术观察AD小鼠与正常小鼠视网膜组织结构上的差异;免疫荧光检测Pr Pc在AD及正常小鼠视网膜组织上的表达情况,共聚焦显微镜观察Pr Pc的亚细胞定位。通过逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测两组小鼠视网膜组织中Pr Pc基因的表达差异;蛋白质印迹法(Western Blot,WB)技术检测两组小鼠视网膜组织中Pr Pc蛋白的表达情况,利用上述的两种实验方法以β-actin作内参因子。分析Pr Pc在阿尔茨海默病的视网膜组织的病理改变中是否存在作用,对进一步研究Pr Pc在阿尔茨海默病视网膜病变中的发病机制提供一定的实验依据。结果:1.通过对AD小鼠及正常小鼠视网膜组织的HE染色,结果显示:在视网膜组织结构中,AD小鼠视网膜组织中的内、外核层细胞数量较正常小鼠视网膜组织明显减少,其视盘盘周神经上皮层厚度较正常小鼠变薄。2.通过对AD小鼠及正常小鼠视网膜组织免疫荧光染色,结果显示:AD小鼠及正常小鼠视网膜组织中均可见Pr Pc表达,但是AD小鼠视网膜组织中Pr Pc的表达明显强于正常小鼠视网膜组织,其平均光密度值(MOD)比较具有统计学差异(P<0.05),Pr Pc主要分布于视网膜内外丛状层、光感细胞层及神经节细胞层上,,共聚焦显微镜观察发现Pr Pc主要定位于细胞膜上。3.实验组与对照组小鼠视网膜组织中内参因子β-actin均表达较稳定,证实本实验所用RT-PCR和Western Blot技术可靠,无明显操作误差;4.RT-PCR结果显示:阿尔茨海默病小鼠视网膜组织中Pr Pc基因表达水平较正常小鼠视网膜组织明显增强,差异均有显著的统计学差异(P<0.05);Western blot结果显示:阿尔茨海默病小鼠视网膜组织中Pr Pc蛋白表达水平较正常小鼠视网膜组织明显增强,差异均有显著的统计学差异(P<0.05)。结论:1.阿尔茨海默病小鼠视网膜和正常小鼠视网膜组织中均存在Pr Pc的表达,且阿尔茨海默病小鼠视网膜的Pr Pc基因和蛋白表达强度均明显强于正常视网膜组织。2.Pr Pc表达主要定位于视网膜内外丛状层、光感细胞层及神经节细胞层上,Pr Pc亚细胞定位于细胞膜上。3.阿尔茨海默病组小鼠视盘盘周神经上皮层厚度较正常组小鼠明显变薄。4.Pr Pc与阿尔茨海默病视网膜病变的发生存在相关性。