紫丹参是我国西南少数民族地区常用的中药材,来源于唇形科鼠尾草属植物云南鼠尾草Salvia yunnanensis C.H.Wright的干燥根茎,有活血祛淤、解毒消肿、凉血消痈等临床功效。紫丹参在贵州、云南等西南地区有悠久的药用历史,最早记载可见于明代的《滇南本草》:紫丹参“一味可抵四物汤补血之功”。在各药品标准中收录的以紫丹参为制剂的成药有十余种,比如丹参益心胶囊、紫丹活血片、紫灯胶囊、舒心降脂片等,主要用来治疗月经不调、胸痹绞痛、骨伤、血瘀肿痛等疾病。目前紫丹参已纳入《云南省中药材标准》、《贵州省中药材质量标准》等地方法规。紫丹参与丹参同属唇形科鼠尾草属药用植物,基原相近,临床功效也相似,故在我国云贵地区紫丹参与丹参常不作细分、混淆使用。那么这种代用是否合理,目前尚缺乏科学依据。为解决紫丹参与丹参的质量一致性问题,本研究拟从紫丹参与丹参的活血、抗炎功效入手,利用关联活性的质量一致性评价方法,选择抗血小板聚集活性、抑制COX-2酶活性、抑制NLRP3炎症小体活性来评估紫丹参与丹参的生物活性。结合超高效液相色谱法对紫丹参、丹参进行多组分化学表征分析,通过联合化学指纹图谱分析和生物活性评价建立综合考察紫丹参与丹参的质量一致性的方法。主要研究内容包含以下以下几个部分:1.基于多组分化学表征的紫丹参、丹参质量一致性评价利用超高效液相色谱法建立紫丹参、丹参10种成分的含量测定方法,结合指纹图谱相似度分析对紫丹参与丹参的质量一致性进行评价。测定结果显示,12批次紫丹参相似度在0.831-0.990之间,10批次丹参药材相似度位于0.990-0.999之间,符合指纹图谱对相似度的要求;化学成分含量方面,紫丹参以丹酚酸类成分为主,丹参以丹参酮类成分居多,含量差异明显。色谱峰面积主成分分析也显示,紫丹参与丹参按化学成分含量明显划分为两类,具有不同的化学特征。紫丹参与丹参在化学组分方面没有一致性。2.基于抗血小板聚集生物活性的紫丹参、丹参质量一致性评价研究本研究以血小板最大聚集率为指标,考察了溶剂DMSO体积分数、血浆离心力、药物浓度等因素,选择隐丹参酮为标准参照物,构建了基于抗血小板聚集的紫丹参、丹参活血效价测定方法。并运用此方法检测了12批次紫丹参、10批次丹参药材的活血生物效价,效价结果显示,紫丹参平均活血效价为667.25U/μg,丹参平均活血效价为1240.7U/μg,约是紫丹参平均活血效价的两倍。进一步方差分析表明,丹参的活血效价显著优于紫丹参,两者在抗血小板聚集生物活性方面存在显著性差异（P<0.0001）,即紫丹参与丹参在抗血小板聚集生物活性方面没有一致性。3.基于抑制COX-2活性的紫丹参、丹参质量一致性评价研究选择COX-2作为活性靶点,以COX-2活性抑制率作为评价指标,考察不同浓度的紫丹参、丹参对于COX-2活性的抑制作用,建立一种结合临床适应症的酶水平的生物活性评价方法。应用该方法对不同批次紫丹参、丹参样品进行生物活性测定,发现两者均有很好的抑制COX-2活性的作用。紫丹参抑制COX-2平均效价为23.962U/mg,丹参抑制COX-2平均效价为28.202U/mg,两者效价数值大体相当。方差分析也表明紫丹参与丹参抑制COX-2生物效价没有显著性差异（P=0.1641）,即紫丹参与丹参在抑制COX-2生物活性方面具有一致性。4.基于抑制NLRP3炎症小体活性的紫丹参、丹参质量一致性评价研究选择Caspase-1作为活性靶点,建立稳定的NLRP3炎症小体细胞模型。以NLRP3炎症小体细胞模型分泌Caspase-1的表达量作为评价指标,考察不同批次紫丹参、丹参对NLRP3炎症小体的抑制作用,发现两者均有很好的抑制Caspase-1表达的作用。紫丹参抑制Caspase-1平均效价为15.245U/mg,丹参抑制Caspase-1平均效价为42.823U/mg,约是紫丹参平均效价的3倍。方差分析结果显示,紫丹参与丹参抑制Caspase-1生物效价具有显著性差异（P<0.05）,即紫丹参与丹参在抑制NLRP3炎症小体活性方面没有一致性。综上,本研究以紫丹参与丹参的质量一致性为切入点,构建了关联活血、抗炎等临床功效的质量评价方法,探究紫丹参、丹参在发挥不同疗效时主要贡献活性成分,通过指纹图谱与生物效价进行相关性研究,从多个生物活性角度评价紫丹参与丹参的质量一致性。该方法为临床功效相似中药的质量一致性评价提供了新思路和新方法。在选定的3种生物活性方面,紫丹参与丹参的作用程度、活性高低存在差异,提示我们两者存在一致性的证据不足。