【摘 要】
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1目的 过度使用损伤（overuse injury）是由反复微创伤引起的渐进性损伤,严重影响了运动员的竞赛水平,损害了劳动者的工作生活。在过度使用损伤的病理性变化中纤维化被认为是引发疼痛和运动障碍的关键。研究表明,巨噬细胞表型转换过程既是肌肉再生的必要前提又是纤维化的介质,但其在过度使用损伤发生机制中的作用尚不清楚。本文通过采用4周过度离心训练,建立过度使用损伤模型,观察巨噬细胞表型转换和分布特征
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1目的 过度使用损伤（overuse injury）是由反复微创伤引起的渐进性损伤,严重影响了运动员的竞赛水平,损害了劳动者的工作生活。在过度使用损伤的病理性变化中纤维化被认为是引发疼痛和运动障碍的关键。研究表明,巨噬细胞表型转换过程既是肌肉再生的必要前提又是纤维化的介质,但其在过度使用损伤发生机制中的作用尚不清楚。本文通过采用4周过度离心训练,建立过度使用损伤模型,观察巨噬细胞表型转换和分布特征,探讨骨骼肌过度使用损伤的成因。2方法 72只雄性SD大鼠随机分为对照组（C组,n=24）;连续离心训练组（E组,n=24）;间歇离心训练组（I组,n=24）。各组又随机分为4个小组,分别对应1周、2周、3周、4周。除C组外其他各组均进行1-4周的离心训练,运动负荷均采用速度、时间递进形式（坡度-16°,时间60-90min,速度16-20m/min）,E组连续训练,每周训练5天,I组隔天训练一次,每周训练3天（周六、周日休息）。每周末次训练后36h,取同侧股中间肌。随后进行Masson三染色技术,观察不同时相骨骼肌纤维化形成过程;免疫组织化学技术,分析不同时相M1型（CD68）巨噬细胞和M2型（CD163）巨噬细胞的数量与分布特征。第4周末次训练后36h,取股中肌,透射电子显微镜观察骨骼肌超微结构变化。3结果3.1骨骼肌纤维化过程:（1）与C组相比,E组1、3、4周胶原纤维沉积呈非常显著性升高（p＜0.01）,但第2周极显著性降低（p＜0.001）;I组均显著增加。（2）E组2E为最低值、4E为峰值,均与其他时相呈极显著性差异（p＜0.001）;I组呈持续降低的趋势,1E、2E、3E之间均有极显著性差异（p＜0.001）。（3）与3I、4I相比,3E、4E均分别极显著性增加（p＜0.001）。3.2骨骼肌M1/M2型巨噬细胞转换:（1）M1型:与C组相比,E组和I组均高于C组。E组呈递增趋势,4E均与1E、2E、3E之间呈极显著性差异（p＜0.001）;I组呈先升高后降低的趋势,2I为峰值,随后下降。与4I相比4E极显著性增加（p＜0.001）。（2）M2型:与C组相比,E组和I组均高于C组。E组呈递增趋势,4E与1E、2E、3E均呈极显著性差异（p＜0.001）;I组呈先升后降趋势,2I为峰值,4I为最低值,且与1I、2I分别呈极显著性差异（p＜0.001）。与3I和4I相比,3E（p＜0.01）和4E（p＜0.001）显著性增加。3.3骨骼肌M1/M2型巨噬细胞分布:（1）M1型:E组和I组在肌束膜上和肌细胞（包括肌内膜）的分布与C组之间均无统计学差异。E组M1型数量百分比在肌束膜上逐周增加,4E分别与1E、2E呈非常显著性升高（p＜0.01）,但4E与3E之间无统计学差异,相应的在肌细胞上逐周降低;I组在肌束膜上呈现逐周增加,4I分别与1I（p＜0.001）、2I（p＜0.01）呈显著性升高,但4I与3I之间无统计学差异,相应的在肌细胞上逐周降低。（2）M2型:与C组相比,E组各时相均无显著性差异;I组肌束膜上,1I低于C组且具有显著性差异（p＜0.05）。E组在肌束膜上呈现逐周增加的趋势,但各时相上均无显著性差异（p＞0.05）;I组呈先升后降,2I为峰值,分别与1I（p＜0.01）、4I（p＜0.05）呈显著性差异。4E高于4I,具有非常显著性差异（p＜0.01）;肌细胞上M2巨噬细胞数量分布成相应的反向趋势。3.4肌束膜厚度与巨噬细胞的相关性:E组肌束膜厚度与肌细胞内M1型呈负相关（p＜0.01,r=﹣0.698）,与M2型呈负相关（p＜0.05,r=﹣0.48）;I组肌束膜厚度与肌细胞内M1呈正相关（p＜0.01,r=0.636）,M2型无线性相关性（p＞0.05,r=﹣0.304）。肌束膜厚度与肌束膜上巨噬细胞数量百分比的相关性与以上相反。4结论4.1骨骼肌过度使用损伤与肌束膜胶原纤维过度沉积,即纤维化现象有关。4.2骨骼肌过度使用损伤不但没有抑制M1/M2型巨噬细胞转换,反而向M2型（CD163）过度转换。4.3骨骼肌过度使用损伤造成M1/M2型巨噬细胞分布变化,M2型（CD163）从肌束膜向肌细胞迁移减少,与肌束膜厚度相关。4.4骨骼肌过度使用损伤与M1/M2型巨噬细胞过度转换引起的分布变化有关。
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