Burkholderia菌是一种能够对抗真菌病害的新型生物农药,它能产生多种抗生素对付真菌感染。现从土壤中分离出一株Burkholderia KDMD。根据Pseudomonas aeruginosa hcnABC基因序列设计引物,扩增出hcnABC基因的2.1kb片段和1.6kb片段。然后用BamHI和PstⅠ双酶切2.1kb片段和Pucp26质粒,将2.1kb片段连接到Pucp26质粒上,因为Pucp26含有LacZ基因,所以用蓝白选择法筛选出阳性单菌落,酶切检验;接着用HindⅢ和PstⅠ双酶切1.6kb片段和上一步连接好的Pucp26质粒,组成完整的hcnABC基因。培养基选用LB培养基,pH值调为7.0,温度分别选用25℃、30℃、37℃和42℃,摇床转速为200r/min,每隔2小时测量一次OD₆₀₀值,绘制Burkholderia KDMD不同温度的生长曲线,确定37℃为最佳培养温度;培养基选用LB培养基,温度选用37℃,pH值分别选用pH4.5,pH5.0,pH5.5,pH6.0,pH6.5,pH7.0,pH7.5,pH8.0,pH8.5,每隔2小时测量一次OD₆₀₀值,绘制KDKD不同pH值的生长曲线,确定pH6.0最佳pH值;选用M9作为基本培养基,氮源选用0.1%的酵母粉,碳源选用1%蔗糖、葡萄糖、果糖、乳糖和淀粉,37℃,pH7.0条件下培养,每隔2小时测量一次OD₆₀₀值,绘制Burkholderia KDMD不同碳源的生长曲线,确定蔗糖为最佳碳源;选用M9作为基本培养基,碳源选用1%的葡萄糖,氮源分别选用酵母粉、蛋白胨、NH₄Cl、NaNO₃,37℃,pH7.0条件下培养,绘制不同氮源的生长曲线,确定酵母粉是最佳氮源。在土豆培养基上用滤纸片法测量Burkholderia KDMD的菌液对4种真菌的抑制作用,发现对马铃薯干腐（eythium solani）的抑制作用最大,其次为西瓜枯萎（Fusarium oxysporium f.sp.niveum）、烟草赤星（Gibberella nicotiancola）和小麦赤霉（Gibberella saubinetii）。用CAS培养基测定出Burkholderia KDMD产生少量铁螯和蛋白,用苦味酸溶液测定出Burkholderia KDMD不产生HCN气体。用Burkholderia KDMD和小麦赤霉（Gibberella saubinetii）的混合液喷洒小麦幼苗,发现与只喷有小麦赤霉（Gibberella saubinetii）的小麦相比,Burkholderia KDMD对小麦赤霉（Gibberella saubinetii）有抑制作用。