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研究背景：肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是临床上较常见的恶性肿瘤之一，具有较高的发病率和死亡率。目前公认的治疗方法是以手术为主的综合治疗，但由于肝癌早期缺乏特异性体征，患者发现肿瘤时往往处于癌症的中晚期，而肝癌术后又极易出现复发和转移，所以多数患者的预后并不理想。因此，人们急需寻找新的治疗靶点以提高肝癌的治疗效果。微小RNA（MicroRNA）是一组非编码小RNA，以转录后调节的方式影响着细胞的生长、增殖、分化过程，并通过抑制下游靶基因的表达发挥调节功能，可同时调控多种下游靶基因。作为microRNA家族中的重要成员之一，MiR-27a不仅参与脂质、骨代谢以及血液系统疾病的调节，还被证明在不同类型肿瘤中都能起到促癌功能。过氧化物酶增殖物激活受体-γ（PPAR-γ），是脂代谢过程中重要的调节因子，同时也被证明能够抑制包括肝癌在内的多种肿瘤的发展。目前仅有少量文献报道MiR-27a在肝癌中具有高表达现象，但其与肝癌发生发展的关系尚不清楚。研究目的：阐述miR-27a在肝癌中的表达及作用机制，同时探讨miR-27a通过抑制靶基因PPAR-γ的表达影响肝癌增殖和发展的机制，为开发肝癌诊治的新靶点提供了理论依据。研究内容： Realtime-PCR方法分析正常人与肝癌患者血清及肝癌组织中miR-27a表达差异；Realtime-PCR方法检测人正常肝细胞系HL-7702与人肝癌细胞系HepG2、Bel-7402、Bel-7404中miR-27a表达水平；应用MiR-27a人工合成类似物mimics及抑制剂inhibitors分别转染HepG2细胞系，通过MTT方法检测其对肝癌细胞生长增殖的影响；流式细胞术检测转染后肝癌细胞凋亡及细胞周期变化；荧光素酶报告基因检测PPAR-γ是否为miR-27a的下游靶点；免疫组化技术检测临床病理切片中PPAR-γ表达；应用PPAR-γ配体激动剂罗格列酮作用于HepG2细胞系，通过Western Blot方法检测miR-27a与罗格列酮刺激后PPAR-γ蛋白表达水平。研究结果：1. miR-27a类似物对HepG2细胞特性影响肝癌患者血清、组织样本及肝癌细胞系中miR-27a高表达，转染miR-27amimics可加速肝癌细胞生长，诱导G1/S期转化，促进细胞增殖；转染miR-27ainhibitors可诱发肝癌细胞G1期阻滞，抑制细胞增殖，增加凋亡比例。2.miR-27a对PPAR-γ的影响PPAR-γ的3’-UTR区存在miR-27a的互补序列，是miR-27a的下游靶基因；转染miR-27a mimics后肝癌细胞内PPAR-γmRNA及蛋白表达明显受抑制；罗格列酮刺激能够相对逆转miR-27a对肝癌细胞增殖特性及PPAR-γ蛋白表达水平的影响。研究结论：MiR-27a在肝癌高表达，能够通过靶基因PPAR-γ，诱使G1/S期转化，促进肝癌细胞增殖，抑制miR-27a的表达能够导致细胞出现G1期阻滞，抑制肝癌细胞增殖，同时促进肝癌细胞凋亡。PPAR-γ配体激活剂罗格列酮能够增强PPAR-γ的表达，抑制肝癌细胞增殖，相对逆转miR-27a的作用。