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目的： 探讨hUCMSCs的分离及培养方法并观察其表面抗原，明确其作为组织工程种子细胞的可行性。同时，利用脱细胞处理的人脐带沃顿胶及脱细胞处理的沃顿胶与其他材料混合制备出不同的软骨组织工程支架并对其开展检测，观察其作为软骨组织工程支架的可行性，再次将hUCMSCs与各种不同支架复合诱导分化体外构建组织工程软骨。 方法： 经由产妇及其家属知情同意后，取足月、剖腹产健康产妇的脐带，分离得到人脐带沃顿胶（Wharton jelly），采用组织块贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞；将人脐带沃顿胶脱细胞处理后，利用其与其他材料混合制备出不同的软骨组织工程支架，并对各组支架开展检测；分组对干细胞进行诱导分化：A组干细胞聚集成团诱导分化，B组干细胞与沃顿胶支架诱导分化，C组干细胞与复合支架诱导分化，然后对诱导后21天的结果分别进行HE染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫荧光染色、实时定量RT-PCR检测，观察最优分化组。 结果： 1、分离得到的hUCMSCs数量充足，形态均一，经检测单纯脱细胞处理的沃顿胶支架及复合支架在以下检测中均符合组织工程支架的要求。 2.经过21天诱导培养，三组均能分化出具有一定弹性和硬度的组织块，其中，A组组织块较小，且硬度及弹性在三组中最差，C组组织块体积最大，B组次之。 苏木精-伊红染色见三组中均有细胞基质分泌，但C组表达最好，A、B组稍差。 甲苯胺蓝染色见C组中大量细胞质被染成蓝色，提示强阳性，B组次之，提示阳性表达，A组最差。 Ⅱ型胶原免疫荧光染色见三组中细胞核呈淡蓝色荧光，细胞质呈红色荧光，C组中有较多红色荧光提示强阳性，B组次之，提示阳性表达，A组最差。 定量RT-PCR检测示Aggrecan和Ⅱ型胶原在A、B、C组中均有表达，其中，C组表达结果最高，且较A、B均存在统计学差异（P＜0.05），B组表达结果次之但明显好于A组，与A组亦存在统计学差异（P＜0.05）。 结论： 经过脱细胞处理的人脐带沃顿胶悬液所制备的支架及其与其他材料混合后制备出的复合支架，符合软骨组织工程支架的基本要求，不同支架与干细胞诱导培养后，可在体外初步构建出组织工程软骨。